[发明专利]制备胰岛素样生长因子-1与聚(乙二醇)的偶联物的方法

说明书

本发明涉及用于制备胰岛素样生长因子-I(IGF-I)与聚(乙二醇)(PEG)的偶联物的方法、含有此类偶联物的药物组合物及使用此类偶联物的方法。 

发明背景 

阿尔茨海默氏病(AD)是神经变性的日益流行形式，其导致了65岁以上年龄的人群中所有痴呆病例的约50％-60％。目前它影响了全世界估计1500万人口，并且由于人群中老年人的相对增多，其流行率很可能在未来20年至30年间增长。AD是从临床症状发作至死亡具有约8.5年平均持续时间的进行性疾病。在与更高的心理功能相关的脑区域中锥形神经元的死亡和神经突触的损失产生典型症状，其特征在于认知功能的严重且进行性损伤(Francis，P.T.，等，J.Neurol.Neurosurg.Psychiatry 66(1999)137-147)。AD是世界上老年性痴呆和早衰性痴呆的最常见形式，在临床上被认为是严重的进行性痴呆，其表现为记忆、智力功能的持续丧失和说话紊乱(Merritt，A Textbook of Neurology，第6版，Lea& Febiger，Philadelphia(1979)，第484-489页)。在神经病理学上AD的主要标志是两个特征性损伤的存在：淀粉状蛋白老年斑和神经纤维缠结(NFT)。当斑点在神经元外沉积时，在死后脑中的神经元内观察到了缠结。淀粉状蛋白斑核心的一种主要成分是病理学上沉积的小淀粉状蛋白β肽(Aβ)，其被来自淀粉状蛋白前体蛋白(APP)的分泌酶切割(Selkoe，D.J.，Physiol.Rev.81(2001)741-766；Hardy，J.和Selkoe，D.J.，Science 297(2002)353-356；Bush，A.I.和Tanzi，R.E.，Proc.Natl.Acad.Sci.美国99(2002)7317-7319)。具有39-43残基(MW～4kDa)的自身聚集肽Aβ合成为更大APP(110-120kDa)的部分。APP是具有大的N末端胞外结构域、单个跨膜结构域和短的胞质 尾区的I型膜内含糖蛋白。Aβ区跨越APP的胞外结构域和跨膜结构域部分。关于APP参与AD中神经细胞死亡的最常见假说是淀粉状蛋白假说。该假说假设斑点淀粉状沉积物或部分聚集的可溶性Aβ触发了神经毒性级联，从而引起与AD病理学相似的神经变性(Selkoe，D.J.，Physiol.Rev.81(2001)741-766；Hardy，J.和Selkoe，D.J.，Science 297(2002)353-356)。 

人胰岛素样生长因子I(IGF-I)是结构上与胰岛素相关的循环激素。传统上认为IGF-I是促生长素在外周组织上发挥作用的主要介质。IGF-I由70个氨基酸组成，也被称为生长调节素C并由SwissProt No.P01343定义。在例如，le Bouc，Y.，等，FEBS Lett.196(1986)108-112；dePagter-Holthuizen，P.，等，FEBS Lett.195(1986)179-184；SandbergNordqvist，A.C.，等，Brain Res.Mol.Brain Res.12(1992)275-277；Steenbergh，P.H.，等，Biochem.Biophys.Res.Commun.175(1991)507-514；Tanner，J.M.，等，Acta Endocrinol.(Copenh.)84(1977)681-696；Uthne，K.，等，J.Clin.Endocrinol.Metab.39(1974)548-554；EP 0 123 228；EP 0 128733；US 5,861,373；US 5,714,460；EP 0 597 033；WO 02/32449；WO93/02695中提到了用途、活性及制备。 

IGF-I的功能调控是非常复杂的。在循环中，仅0.2％的IGF-I以游离形式存在，而大多数结合IGF结合蛋白(IGFBP’s)，所述IGF结合蛋白对IGF具有很高的亲和力，并调节IGF-I的功能。可通过释放IGF-I的机制(如通过蛋白酶蛋白水解IGFBP)局部释放所述因子。