[发明专利]尼古丁-载体疫苗制剂

说明书

发明背景 

发明领域

本发明属于医药、疫苗和药物制剂领域。本发明提供了包含尼古丁-病毒样颗粒缀合物和稳定剂的制剂，其中所述的稳定剂包含非还原二糖和非离子型表面活性剂。冻干的制剂于室温经长的储存时间后是稳定的。 

相关技术： 

用于治疗或预防尼古丁成瘾的疫苗近来吸引了公众的注意。这些疫苗通常含有与载体共价结合的尼古丁分子，因为尼古丁是低分子量有机化合物且不能通过其本身引起免疫反应。此外，由于尼古丁没有能用于此类与载体结合的合适的官能团，通常需要将连接序列引入尼古丁分子。近来已经报道了数种疫苗的开发，例如在US5’876’727、US6’232’082、US6’656’469和US6’932’971中。所描述的缀合物不仅在载体的性质上有所不同，而且连接序列的性质和将连接序列引入到尼古丁上的位点也不同。 

US6’932’971描述了将尼古丁分子通过具有酯官能度的连接序列与病毒样颗粒(VLP)的偶联，形成了有序的且重复的尼古丁-载体缀合物并引起了高滴度尼古丁特异性抗体的产生。相同的作者最近显示了包含通过具有酯官能度连接序列与尼古丁分子共价结合的RNA噬菌体Qβ病毒样颗粒的疫苗能对人类戒烟有效(Maurer等，Eur.J.Immun.200535：2031-40)。 

疫苗组合物稳定和最小化或避免化学和/或物理降解的需要要求开发满足此类需求的制剂。 

发明概述

我们目前惊奇地发现了能够稳定尼古丁-病毒样颗粒缀合物的冻干制剂，所述缀合物含有通过连接序列方式与病毒样颗粒共价结合的尼古丁分子，所述连接序列包含至少一个羧酸酯官能度。此外，我们惊奇地发现这一冻干制剂于室温甚至于升高的温度(40℃)经长的一段保存时间过程中是稳定的。而且，本发明的冻干制剂包含简单且经济的稳定剂组合物，因为在其中包含最少量的赋形剂。 

因此，一方面，本发明提供了冻干制剂，其包含：(i)至少一个尼古丁-病毒样颗粒缀合物，该缀合物包含：(a)病毒样颗粒；和(b)至少一个尼古丁分子，其中所述至少一个尼古丁分子通过连接序列共价结合至所述病毒样颗粒，其中所述的连接序列包含酯官能度；以及(ii)稳定剂组合物，其包含：(c)至少一种非还原二糖，其中所述非还原二糖的浓度就冻干之前制剂中的浓度而言是0.5％至15％(w/v)；(d)至少一种非离子型表面活性剂，其中所述非离子型表面活性剂的浓度就冻干之前制剂中的浓度而言是0.0005％至0.1％(w/v)；以及其中所述稳定剂组合物在冻干之前具有从5.4至6.6的pH值。 

另一方面，本发明提供了用于制备本发明冻干制剂的方法。 

还在另一方面，本发明提供了包含溶解和/或悬浮于生理可接受的溶液或无菌水、优选注射用水(WPI)的本发明冻干制剂的重构制剂。在其它优选的实施方案中，重构制剂进一步包含佐剂。 

发明详述 

除非另外定义，文中使用的技术和科学术语具有与发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。 

佐剂：本文所用的术语“佐剂”是指免疫反应的非特异性刺激物或允许在宿主中产生积存的物质，当其分别与本发明的疫苗和药物组合物联合时能提供甚至更增强的免疫反应。可以应用各种佐剂。实例包括完全和不完全弗氏佐剂、氢氧化铝和改良的胞壁酰二肽。其它佐剂是矿物凝胶诸如氢氧化铝、表面活性物质诸如溶血卵磷脂、复合多元醇(pluronic polyols)、  聚阴离子、肽、油乳剂、匙孔血蓝蛋白、二硝基酚、以及潜在有用的人类佐剂，诸如BCG(结核菌苗)和小棒杆菌(Corynebacterium parvum)。此类佐剂在本领域也是公知的。其它可以与本发明组合物施与的佐剂包括但不限于单磷酸脂类免疫调节剂、AdjuVax100a、QS-21、QS-18、CRL1005、铝盐(明矾)、MF-59、OM-174、OM-197、OM-294和病毒体佐剂技术(Virosomal adjuvant technology)。佐剂也可以包含这些物质的混合物。通常已将VLP描述为佐剂。然而，在这一申请上下文中使用的术语“佐剂”不是指用于本发明制剂的VLP，而是指包括所述VLP在内的佐剂。 

外壳蛋白：在这一申请中，术语“外壳蛋白”(coat protein)可以与术语“衣壳蛋白”(capsid protein)互换使用，是指病毒蛋白，优选病毒的天然衣壳的亚单位，其能被掺入病毒衣壳或VLP中，其中所述病毒优选是RNA噬菌体。