[发明专利]制备多糖衍生物的方法

说明书

技术领域

[0001]

本发明涉及制备多糖衍生物的方法。

背景技术

[0002]

按照多糖的构成单糖的类型，存在各种不同的多糖。多糖具有不同的分子量、特性和生理功能，并且是深入研究的时兴目标。

正如本领域已知的那样，具有能够与羧基缩合的官能团的化合物与透明质酸的羧基，(认为透明质酸是高分子量多糖)的偶合，可以降低所得到透明质酸衍生物的亲水性，并且引起溶解度小或甚至不溶解的问题。

使羧基-可连接的亲核官能团与透明质酸的羧基偶合的一个传统已知技术是使用水溶性的碳二亚胺(WSC)，以使透明质酸与氨基在含水溶剂中反应(JP 2004-018750和WO2005/085294)。下文将该技术称为WSC方法。通过WSC方法获得的透明质酸衍生物具有溶解度小或不溶解的问题。按照JP 2004-018750中的说明，当透明质酸的每个双糖单位引进化合物比率(取代度)不小于0.05％时，分离的透明质酸衍生物不溶于中性含水溶剂。当取代度不小于5％时，分离的透明质酸衍生物不溶于含水溶剂。

[0003]

对于这种不溶解的问题，JP 2004-018750中推荐的制备方法是，透明质酸的缩合反应之后，向反应溶液中添加碱。这种碱处理使WSC方法制备的化合物能够溶于中性含水溶剂。WO 2005/085294也采取了JP2004-018750的这种碱处理步骤，从而制备所得到透明质酸衍生物的中性水溶液。换句话说，JP 2004-018750和WO2005/085294采取了两步制备方法：包括WSC方法的缩合反应步骤，和碱处理步骤，从而制备可溶于含水溶剂的透明质酸衍生物。

[0004]

如JP 2004-018750所述，预期通过常规WSC方法制备的透明质酸衍生物在其高级结构方面具有变化，这可以以在中性含水溶剂中不溶解现象的形式观察到。WSC方法的缩合条件导致透明质酸衍生物不溶于中性含水溶剂。WSC方法之后进行碱处理，如JP 2004-018750所述，可以恢复透明质酸衍生物的溶解性。水溶性的恢复是由于通过WSC方法改变的高级结构的进一步改变或恢复。

JP 2004-018750所描述的碱加入步骤(碱处理)，可以使缩合反应期间已经改变的高级结构得到进一步改变或恢复，从而恢复曾经失去的、对含水溶剂的高亲合性。

[0005]

可商业购买的缩合剂4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐(DMT-MM)可以使羧基和羧基-可连接的亲核官能团缩合，并且通过低分子物质的缩合而主要用于合成酰胺化合物。按照Tetrahedron 55(1999)13159，DMT-MM在含水溶剂中活化羧基，并且帮助与氨基高速形成酰胺键。JP 2005-281372描述了DMT-MM在羧基引进的环糊精衍生物的羧基和壳聚糖的氨基之间形成酰胺键的应用。然而，JP 2005-281372的这种制备方法的目的在于得到不能溶解的衍生物。为了制备水溶性的衍生物，DMT-MM应用于高分子量多糖(例如透明质酸)的羧基与有机化合物羧基-可连接的官能团的缩合反应一直没有报道。对于描述所得到衍生物水溶液的特性或所得到衍生物的高级结构的变化，也没有报道。

本发明公开内容

[0006]

用于缩合反应的传统水溶性缩合剂(水溶性的碳二亚胺)，已经用于在多糖的羧基和有机化合物的可以与羧基缩合的官能团之间形成化学键。然而，所制备的多糖衍生物不能均匀地溶于中性含水溶剂中。为了提高产物的溶解性，缩合反应之后，需要向反应溶液中加入碱的额外步骤。

还有很高的开发简单方法的需求，要求这种方法通过具有羧基的多糖与具有能够与羧基缩合的官能团的有机化合物进行偶合反应，能够制备高度可溶性产物。

[0007]

如上所述，通过透明质酸或具有羧基的其它多糖，和具有能够与羧基缩合的官能团的有机化合物进行反应所制备的现有技术的多糖衍生物，在它们的高级结构方面具有显著的变化，并且在中性含水溶剂中不容易溶解。

为了解决现有技术的这种问题，并且为了设计制备多糖衍生物的简单和有效的方法，本发明人进行了深入的研究。深入研究的结果是，本发明人发现，使用特定缩合剂来代替传统上使用的缩合剂WSC，可以容易且有效地获得有用的多糖衍生物，其在含水溶剂中具有良好的溶解性，由此完成了本发明。

[0008]

因此，本发明涉及制备高分子量多糖衍生物的简单和有效的方法。