[发明专利]分离胎儿滋养层无效
申请号: | 200780015162.0 | 申请日: | 2007-03-22 |
公开(公告)号: | CN101432441A | 公开(公告)日: | 2009-05-13 |
发明(设计)人: | R·皮切尔;R·法戈纳尼 | 申请(专利权)人: | 生物概念股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 韦 东 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 胎儿 滋养 | ||
1.一种从宫颈粘液中分离胎儿滋养层细胞的方法,该方法包括:
(a)将含有获自宫颈粘液的样品的混合物与核酸酶和蛋白酶温育;和
(b)从该混合物分离胎儿滋养层细胞。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法还包括先将该混合物与粘液溶解剂和糖水解酶温育,再将该混合物与核酸酶和蛋白酶温育。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在约35℃-约40℃之间的温度温育该混合物。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在约37℃温育该混合物。
5.如权利要求3或4中任一项所述的方法,其特征在于,将该混合物温育约2分钟-约5分钟之间。
6.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在约35℃-约40℃之间的温度将该混合物与粘液溶解剂和糖水解酶温育。
7.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在约37℃的温度将该混合物与粘液溶解剂和糖水解酶温育。
8.如权利要求6或7中任一项所述的方法,其特征在于,将该混合物与核酸酶和蛋白酶温育约10分钟-约15分钟之间。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述核酸酶是核酸内切酶、核酸外切酶、限制酶、DNA酶、DNA酶I、绿豆核酸酶或
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述蛋白酶是分散酶、链霉蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶。
11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述核酸酶是DNA酶I,所述蛋白酶是链霉蛋白酶。
12.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述粘液溶解剂是N-乙酰基半胱氨酸、二硫苏糖醇、盐酸溴苄环已烷、L-半胱氨酸、透明质酸裂解酶、透明质酸氨基葡糖苷酶、透明质酸葡糖苷酸酶或透明质酸酶。
13.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述粘液溶解剂是N-乙酰基半胱氨酸,所述糖水解酶是β-半乳糖苷酶。
14.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述核酸酶是DNA酶I,所述蛋白酶是链霉蛋白酶,所述粘液溶解剂是N-乙酰基半胱氨酸,所述糖水解酶是β-半乳糖苷酶。
15.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法还包括使所述混合物与EDTA、EGTA或解离酶接触。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,该方法还包括:
(a)离心所述混合物以浓缩所述细胞;
(b)重悬所述细胞;
(c)离心所述细胞;
(d)重悬所述细胞;和
(e)离心所述细胞。
17.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法还包括:用固体表面上的结合实体分离胎儿滋养层细胞与母体细胞。
18.如权利要求17所述的方法,其特征在于,所述结合实体在微型通道装置的表面上。
19.如权利要求17所述的方法,其特征在于,所述结合实体是抗体。
20.一种从宫颈粘液中分离胎儿滋养层细胞的试剂盒,该试剂盒装有:
核酸酶;和
蛋白酶;和
描述使用该试剂盒从宫颈粘液中分离胎儿滋养层细胞的一套书面使用说明书。
21.如权利要求20所述的试剂盒,其特征在于,该试剂盒还装有:
粘液溶解剂;和
糖水解酶。
22.如权利要求20或21所述的试剂盒,其特征在于,该试剂盒还装有:
结合实体;
其中所述结合实体与胎儿滋养层细胞特异性结合。
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