[发明专利]假性感染性黄病毒及其用途

说明书

发明背景

发明领域

本发明涉及分子生物学，病毒学和免疫学领域。一般而言，本发 明公开了属于黄病毒科的复制缺陷病毒的构建和它们作为疫苗在预 防由属于该科的病毒引起的疾病中的用途。更特别地，本发明提供了 复制缺陷黄病毒或假性感染性黄病毒(PIV aka RepliVAX)并公开了 其作为针对黄病毒相关疾病的预防性疫苗的用途。

相关领域的描述

黄病毒科的黄病毒属包含了多种重要的人和动物病原体，并且基 于免疫学测试中的反应性差异分类为四种不同的抗原复合物。通常， 黄病毒在禽类或哺乳动物扩增宿主和蚊子或蜱(tick)载体之间循环。

黄病毒基因组是缺少3’端聚(A)序列的阳性极性的单链戴帽的 RNA。它编码单个多肽，所述单个多肽在翻译时或翻译后加工为病毒 结构蛋白，C、prM/M和E，形成病毒颗粒，和病毒基因组复制和包 装为感染性病毒体所需要的非结构蛋白，NS1，NS2A，NS2B，NS3， NS4A，NS4B和NS5(Chambers，1990)。病毒体(virions)包含病毒基因 组RNA的单个拷贝，所述病毒基因组RNA包装为含C蛋白的核壳， 被具有M和E蛋白的异源二聚体的脂质体被膜包围。与许多其它被 膜病毒相比，核壳和被膜刺突之间的反应不是非常特异性的，并且含 M/E被膜可在源于异源黄病毒的核壳周围有效形成，证实了衣壳序列 的有限水平的同源性(Lorenz，2002)。或者，在没有C的情况下prM和 E的表达可导致形成亚病毒颗粒(SVPs)，其不包含RNA或C蛋白 (Mason，1991)。

生产亚病毒颗粒的prM/M-E盒已成为本领域已知的几种疫苗候 选物的基础。这些疫苗候选物包括亚基(Konishi，1992；2001；2002； Qiao，2004)，DNA(Phillpotts，1996；Kochel，1997；Schmaljohn，1997； Colombage，1998；Aberle，1999；Konishi，2000；Konishi，2000；Kochel， 2000；Davis，2001)，活载体(Mason，1991；Konishi，1992；Pincus，1992； Fonseca，1994；Pugachev，1995；Colombage，1998；Kanesa，2000；Minke， 2004)疫苗。但是，这些疫苗具有严重的缺点。例如，亚基疫苗是使用 安全的，但难以大量生产；DNA疫苗免疫原性很弱，病毒载体疫苗在 存在载体免疫性时缺乏效价。

因此，尽管人们非常关注黄病毒相关疾病和黄病毒持续扩散到新 领域，对于这些感染仍然没有开发出抗病毒治疗剂，并且至今只生产 出了非常有限量的批准疫苗。失活病毒疫苗(INVs)已被批准用于防 止蜱传脑炎(TBEV)和日本脑炎(JEV)。然而，像其它失活病毒疫 苗一样，这些疫苗具有低的有限的效价并且需要多次疫苗接种。尽管 有这些缺陷，日本脑炎和蜱传脑炎INVs具有好的安全性记录的优点。 唯一批准的针对黄病毒的活减毒疫苗(LAV)是广泛应用的基于黄热 病病毒(YFV)17D株的活减毒疫苗，所述黄热病病毒17D株是通过 黄热病病毒的野生型Asibi株在鸡胚组织中连续传代而发展出的。尽 管这种活减毒疫苗被认为是非常安全和有效的，接种者中黄热病的例 子还是有报导，包括最近在美国新兵招募中的出现的例子(Gerasimon， 2005)。而且，这种疫苗不推荐用于婴儿、孕妇和免疫受损的个体中， 因为有副反应，包括疫苗相关脑炎。