[发明专利]作为心脏功能调节剂的磷酸酶抑制剂蛋白-1

说明书

相关申请/专利和引入作为参考

本申请要求2006年2月10日申请的美国临时申请序号 60/772,327的优先权，该临时申请的内容在此引入作为参考。

本文中所引用的每篇申请和专利以及每篇申请和专利中所引用 的每篇文件或参考文献(包括在每篇公开专利的起诉过程中；“申请引 用的文件”)，对应于和/或享有这些申请和专利中任一优先权的每篇 PCT和外国申请或专利，和每篇申请引用文件中引用或参考的每篇文 件，都特地在此引入作为参考。更一般地说，本文中所引用的文件或 参考文献，或者在权利要求之前的参考文献列表中，或者在正文本身 中；并且，这些文件或参考文献(“在此引用的参考文献”)中的每一 篇，以及每篇在此引用的参考文献中引用的每篇文件或参考文献(包括 任何制造商的技术说明、说明书等)，都特地在此引入作为参考。

政府资助声明

以下发明部分地使用美国政府机构资助的资金开发。因此，美国 政府对本发明主题具有一定的所有者权益。资金赞助机构为国立卫生 研究院，资金按照合同号HL-64018、HL-26057和HL-77101授予。

发明背景

先前已确认(美国专利申请公开号20050066381)，蛋白激酶Cα (“PKC-α”)活性在心力衰竭病理状态中增加。磷酸酶抑制剂蛋白-1(I-1) 是心肌收缩性的一种关键的调节剂。已知I-1通过抑制蛋白磷酸酶-1 (“PP-1”)的活性调节心肌收缩性。还已知I-1抑制PP-1的能力受磷 酸化调节。当I-1的苏氨酸35被蛋白激酶A(PKA)磷酸化时，PP-1活 性受到抑制，心肌收缩性增强(Pathak，A.等，2005 Circ Res 15：756-66)。 先前表明，丝氨酸67(S67)是PKCα磷酸化位点，模拟组成型非磷酸 化状态的S67I-1突变体(例如S67A)相对于野生型I-1显示出磷酸化降 低。然而，体外测试条件不能揭示出对PP-1活性的任何抑制作用。

心力衰竭也称为充血性心力衰竭，是一种心肌收缩性降低并且心 脏失去其有效泵血能力的疾病。估计单在美国患者就超过1000万人。 心力衰竭几乎总是慢性的、长期的病症，耗费了过多的医疗干预和人 力物力。具体地说，心力衰竭对其它身体器官的影响在患者的生产性 生活全面下降和治疗费用两方面都是毁灭性的。该病症可影响心脏的 右侧、左侧或两侧。因为心脏的泵血作用被损害，所以血液开始退回 到机体的其它区域中。许多器官和器官系统由于缺乏氧分和营养物质 而开始承受累积损伤。

可能有多种潜在的病因，心力衰竭随着年龄增长而变得更常见。 问题在于某些心力衰竭患者没有明显可察觉的症状，使得表现出严重 的外周病症，而没有早期干涉的利益来防止或减轻严重的器官损伤 率。常规筛查和早期检测能够使患者决定生活方式和饮食的改变，这 种改变将减慢该疾病的发展。在发生重要器官损伤之前，显然需要用 于大规模筛查、早期和精确检测以及预测心力衰竭的发展的方法。另 外，特别是对于老年患者，需要额外的长期治疗选择，其不完全依赖 于与药物摄入时间表的相适性。

发明概述

因此，本发明提供新核苷酸序列，其编码含有新形式的磷酸酶抑 制剂蛋白-1的多肽及其功能性片段，可用于在包括人的动物中调控心 肌收缩性的方法中。可将核苷酸序列导入心脏细胞中，并可以使用本 领域已知的技术触发表达条件。导入遗传物质可能是为了针对长期表 达能力而掺入宿主遗传物质中的目的，或者是为了较短的瞬时表达需 要的目的。另外，为含有新形式I-1的新多肽形式的表达产物自身可 作为调控物直接或间接给予，尤其是在更急性发作的情况下。

一方面，本发明提供分离的核酸分子，其编码含有SEQ ID NO：5 的氨基酸序列的组成型非磷酸化磷酸酶抑制剂-1蛋白或其组成型非磷 酸化片段。在本发明的一个实施方案中，分离的核酸分子包含SEQ ID NO：3。