[发明专利]具有抗冻活性的来自甲壳类的蛋白质

说明书

技术领域

本发明涉及具有抗冻活性的蛋白质及其制造方法、应用。

背景技术

通常说水在0℃下成为冰，但严格来讲，已知有即使冷却纯水，在0℃下也不开始冻结，即使在凝固点以下的温度也不冻结的过冷现象。水的冻结是以如下过程进行的，即，当温度为0℃以下时，存在于水中的某种物质成为冰的核，来生长结晶。如果可控制该冻结现象，就能应用于以食品的冻结保存技术、微生物或生物组织的保存技术等为代表的，人工降雨技术、冷热输送技术等各领域

作为与水的冻结有关系的物质而被关注的是冰核蛋白质(Ice NuclearProtein；INP)和抗冻蛋白质(Anti-Freeze Protein；AFP)。

冰核活性细菌是具有使即使在-20℃也不冻结的纯水在-2～-4℃冻结的能力的细菌，作为水开始冻结时的核来发挥作用，这样的细菌是引起植物产生冻伤害的原因。作为该冰核活性细菌，已知有假单胞菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwinia)的细菌(非专利文献1、2)。冰核蛋白质是从这些冰核活性细菌得到的具有冰核活性的蛋白质。冰核蛋白质大半来自微生物，也有人提出在食品领域中的应用，但是现状是并不太实用。

抗冻蛋白质是显示出阻止冰晶生长的活性的蛋白质，是由多种在低温环境下生活的生物种类所产生的蛋白质。这些生物种类是在南极海或低温环境下生活的鱼、在寒冷地带生长的植物、在寒冷地带越冬的甲虫的幼虫、适应于低温的微生物等。此前，有人报导了来自植物的抗冻蛋白质(专利文献1，2)、来自地衣类的抗冻蛋白质(专利文献2)、来自鱼的抗冻蛋白质(专利文献3，4)、来自昆虫的抗冻蛋白质(专利文献5)等。虽然从这么广的范围的生物种类得到抗冻蛋白质，但是，还没有对于来自甲壳类的抗冻蛋白质的报导。

专利文献1：国际公开WO98/04148公报

专利文献2：国际公开WO99/37673公报

专利文献3：国际公开WO96/11586公报

专利文献4：国际公开WO97/02343公报

专利文献5：国际公开WO99/00493公报

专利文献6：国际公开WO90/13571公报

非专利文献1：Appl.Microbiol.28，p456，(1974)

非专利文献2：Proc.4th Int.Cont.Plant.Path.Bact.P725，(1978)

发明内容

发明要解决的问题

本发明的课题在于提供一种在安全性、活性、生产性、价格等方面良好，可在以食品领域为代表的广阔领域使用的、具有抗冻活性的物质。

解决问题的手段

发明人考虑到，由于从很多种类的生物物种中发现了抗冻蛋白质，因此，南极海中生存的磷虾也许也含有这样的蛋白质，基于这样的想法，而开始了试验，但是用公知的文献中记载的方法，并没能得到具有抗冻活性的物质。通过钻研提取方法，发现了具有抗冻活性的蛋白质，进一步发现了具有冰核活性的蛋白质。此外，也研究了磷虾以外的甲壳类，结果，通过采用同样的提取方法，成功地得到了类似的蛋白质。

本发明提供(1)～(3)的具有抗冻活性的蛋白质。

(1)一种来自甲壳类的具有抗冻活性的蛋白质。

(2)根据(1)的具有抗冻活性的蛋白质，其中，来自甲壳类的蛋白质是这样的蛋白质，即，利用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺电泳法测定分子量，在还原条件下，其分子量约为37000、约16000和/或约15400，N末端氨基酸用序列号1或2来表示。

(3)根据(1)或(2)的具有抗冻活性的蛋白质，其中，甲壳类属于虾类、螯虾类、蟹类、磷虾类、虾蛄类中的任一类。

本发明提供(4)～(6)的具有抗冻活性的甲壳类提取物。

(4)一种具有抗冻活性的甲壳类提取物，其含有来自甲壳类的具有抗冻活性的蛋白质。

(5)根据(4)的具有抗冻活性的甲壳类提取物，其中，来自甲壳类的具有抗冻活性的蛋白质是这样的蛋白质，即，利用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺电泳法测定分子量，在还原条件下，其分子量约为37000、约16000和/或约15400，N末端氨基酸用序列号1或2来表示。

(6)根据(4)或(5)的具有抗冻活性的甲壳类提取物，其中，甲壳类属于虾类、螯虾类、蟹类、磷虾类、虾蛄类中的任一类。

本发明提供(7)～(13)的具有抗冻活性的甲壳类提取物的制造方法。

(7)一种具有抗冻活性的甲壳类提取物的制造方法，其特征在于，从甲壳类的壳、肉和/或内脏进行热水提取。