[发明专利]分泌性白细胞蛋白酶抑制剂通过糜酶的加工

说明书

相关专利申请的交叉引用

本专利申请要求于2006年1月12日申请的申请号为60/758,400的优先权，将其全部内容以引用方式并入本文。

技术领域

本发明涉及分析糜酶(chymase)活性的方法。具体而言，本发明涉及诊断糜酶相关疾病或者通过测量SLPI加工来评价人受试者的糜酶相关疾病的治疗效率。

背景技术

分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(Secretory Leukocyte ProteaseInhibitor，SLPI)作为弹性蛋白酶和组织蛋白酶G的11.7kD抑制剂而被首次发现(Thompson等，Proc Natl Acad Sci USA(《美国国家科学院院刊》)1986；83：6692-6)。SLPI由肥大细胞表达(Westin等，Biol Chem1999；380：489-93)，并存在于上气道粘膜(Fryksmark等，Ann Otol RhinolLaryngol1982；91：268-71)和痰(Kramps等，J Histochem Cytochem1981；29：712-9)中。已在鼻腔(Lee等，Am Rev Respir Dis 1993；147：710-6)、气管和支气管(Kramps等，Am Rev Respir Dis 1984；129：959-63；Mooren等，J Histochem Cytochem 1982；30：1130-4)、上颌窦(Fryksmark等，出处同上)以及细支气管上皮的杯状细胞(Willems等，Am Rev Respir Dis 1989；139：1244-50)中测量出大量的SLPI。

SLPI的晶体学研究已表明，该分子属于乳清酸性蛋白样家族中的成员(Grutter等，Embo J 1988；7：345-51)。这些蛋白质具有两组4个二硫键连接起来的结构域。每个结构域的4个二硫键以及螺旋结构使SLPI成为非常稳定的蛋白质。已经表明，牛(Grutter，出处同上)和绵羊(Pemberton等，Biochim Biophys Acta 1998；1379：29-34)的肥大细胞蛋白酶在Leu72-Met73处裂解SLPI。其它研究显示出SLPI的一种较低分子量的加工产物，但还没有描述负责这种裂解的酶的特征(Ota等，Hum Reprod 2002；17：2517-22)。SLPI被描述为糜酶的最有效抑制剂(Walter等，Arch Biochem Biophys 1996；327：81-8；以及Fink等，BiolChem Hoppe Seyler 1986；367：567-71)。

糜酶是一种属于肽酶家族S1的糜蛋白酶型丝氨酸蛋白酶，其在皮肤和肺的肥大细胞和小球白细胞中表达，并被认为在胞外基质的降解、粘膜下腺体分泌的调节和血管活性肽的生成中起作用。一旦肥大细胞激活后，该糜酶被释放进胞外基质，其立即具有最大活性(Takai等，FEBS Lett 467：141-144，2000)。有两种形式的哺乳动物糜酶，即α糜酶和β糜酶，它们在物种上不同并具有不同的功能。在人和狒狒中，只发现了α-糜酶，而在狗、大鼠和小鼠中α-糜酶和β-糜酶两者都有(Dell’Italia等，Curr Opin Cardiol 2003 17：374-379)。

尽管糜酶确切的病理生理作用仍有待确定，但是已经发现其参与微血管渗漏、嗜中性粒细胞积聚、粘液分泌的刺激以及细胞因子的调节等方面。有效的糜酶选择性抑制剂可能适用于肥大细胞介导的疾病，如哮喘、肺部炎症和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。因为糜酶可以在心脏和血管壁的血管紧张素II的生成中起作用，因此糜酶抑制剂可能在作为血管壁损伤和炎症(动脉粥样硬化/再狭窄)以及心脏肥大的抗高血压治疗方面具有潜在的应用。糜酶是心血管疾病治疗的靶标(Doggrell等，Can J Physiol Pharmacol.2005 Feb；83(2)：123-30)。另外，已经提出糜酶在诸如类风湿性关节炎(Kobayashi等，Jpn J Pharmacol.2002 Sep；90(1)：7-11)、糖尿病性肾病(Huang等，J Am Soc Nephrol.2003Jul；14(7)：1738-47)以及炎性疾病(Muto等，Idrugs.，2002，12，1141-50)之类的疾病中起重要作用。