[发明专利]使用地中海拟无枝酸菌细胞制备11β－羟基－9β,10α－类固醇类的方法

说明书

技术领域

本发明涉及地中海拟无枝酸菌(Amycolatopsis mediterranei)物 种的菌株用于将9β，10α-类固醇类(反类固醇类)微生物转化为其对应的 11β-羟基类似物的用途，以及涉及该物种的特定菌株。另外，本发明 涉及使用地中海拟无枝酸菌物种的菌株将9β，10α-类固醇类(反类固醇 类)转化为其对应的11β-羟基衍生物的方法，并涉及随后从细菌培养基 中分离11β-羟基衍生物。得到的11β-羟基化产物是制备在11β-位置上 具有不同类别取代基的具有9β，10α-构象的新型类固醇类化合物的有用 中间体。

背景技术

通过引用将本文用于说明本发明背景的出版物和其它资料，尤其 是提供关于实践的另外细节的案例并入本文，并不承认其是现有技 术。

反类固醇类

反类固醇类，即具有9β，10α-构象的类固醇，在本领域中是众所 周知的。市售可得的下式(I-1)化合物地屈孕酮((9β，10α)-孕-4，6-二烯- 3，20-二酮)

是一种口服有效的孕激素，并通常用于纠正机体内的孕酮缺乏。通过 照射和光化学反应合成地屈孕酮例如描述于欧洲专利EP0152138B1 (US 4,601,855)和EP0558119B1(US 5,304,291)中。

另外已知的反类固醇类例如，如US 3,937,700中公开的1，2-亚甲 基-3-酮-Δ^4，6-双脱氢-6-卤代-9β，10α-类固醇和如BE 652,597和 US 3,304,314所描述的3-酮-Δ^4，6-双脱氢-6-卤代-9β，10α-类固醇。此 外，专利US 3,555,053描述了一种制备6-卤代-或6-烷基-9β，10α-类固 醇的方法。一些6，7-脱氢-9β，10α-类固醇由Westerhof&Hartog[1965] 描述。另外反类固醇的合成公开于Hartog等[1972]中，关于一些16- 亚甲基-17α-乙酰氧基-9β，10α-孕-4，6-二烯-3，20-二酮衍生物和Halkes 等[1972]中，关于1，2β-亚甲基-17α-乙酰氧基-9β，10α-孕烷。另外，18- 烷基-9β，10α-孕烷衍生物由Van Moorselaar&Halkes[1969]公开。然 而，迄今已知的反类固醇类化合物全部被开发具有促孕活性，即是孕 酮受体激动剂。

显示激素活性并在C11位上携带羟基或酯化的羟基取代基的另外 的反类固醇已描述于GB 1,111,320中。特别描述的化合物或中间体是

11β-羟基-9β，10α-孕-4，6-二烯-3，20-二酮(CAS No.22413-62-3)，

11β-羟基-9β，10α-孕-4-烯-3，20-二酮(CAS No.10007-43-9)，和

11β-17α-二羟基-9β，10α-孕-4-烯-3，20-二酮(CAS No.4076-89-5)， 以及其11β-乙酰氧基衍生物，其由对应的11β-羟基化合物通过化学修 饰得到。

由于化合物(它们是孕酮受体的激动剂、部分激动剂(即部分活化 剂和/或组织特异性活化剂)和/或拮抗剂，优选显示平衡的激动/拮抗特 征)被认为对妇女健康的改善具有重要价值，因此仍然需要开发新型的 用改进的激动和/或拮抗模式在治疗上调节孕酮受体的化合物，其显示 对孕酮相对于其他的甾体激素受体具有较目前已知的化合物更高的受 体选择性，并且其提供了一种良好的组织选择性(例如，对子宫组织相 对于乳腺组织的选择性)。在C11β-位置上携带不同类型取代基的反类 固醇类化合物可以实现此目标。然而，尽管有化合物公开于 GB 1,111,320中，但是迄今为止没有公开在C11β-位置上携带不同类取 代基的反类固醇衍生物。

因此，本发明的主要方面是提供可用于制备在C11β-位置上携带 不同类型取代基的具有9β，10α-构象的新型类固醇类化合物(甾体化合 物)的关键中间体，以及一种以高收率和产量得到希望的中间体的方 法。这些关键的中间体优选在甾核的C11β-位置具有羟基基团，并包 含11β-羟基-地屈孕酮，11β-羟基-9β，10α-孕酮及其衍生物。

甾核C11位的微生物转化-羟基化