[发明专利]使用地中海拟无枝酸菌细胞制备11β－羟基－9β,10α－类固醇类的方法

权利要求书

1.地中海拟无枝酸菌(Amycolatopsis mediterranei)物种的细菌 微生物用于将通式(I)的9β，10α-类固醇类化合物转化成其相应的11β- 羟基类似物的用途，

其中

R1和R4一起形成氧，或者

R4是β-乙酰基基团，且R1选自氢、-OH、-O-(C₁-C₄)烷基和-O- CO-(C₁-C₄)烷基，以及

R2和R3都是氢，或者一起形成亚甲基，

其中所述的地中海拟无枝酸菌物种的细菌微生物选自以 DSM 17416保藏的LS30或选自DSM43304。

2.以DSM 17416保藏的地中海拟无枝酸菌LS30菌株。

3.将通式(I)的9β，10α-类固醇类化合物微生物体外转化成其相应 的11β-羟基类似物的方法，

其中

R1和R4一起形成氧，或者

R4是β-乙酰基基团，且R1选自氢、-OH、-O-(C₁-C₄)烷基和-O- CO-(C₁-C₄)烷基，以及

R2和R3都是氢，或者一起形成亚甲基；

该方法包括在发酵培养基中将式(I)的化合物与能够进行式(I)化合 物向其相应的11β-羟基类似物转化的地中海拟无枝酸菌物种的细菌成 员接触，其中所述的地中海拟无枝酸菌物种的成员选自以DSM 17416 保藏的LS30或选自DSM43304。

4.根据权利要求3的微生物体外转化的方法，其中所述的 9β，10α-类固醇类化合物具有通式(II)

其中

R1选自氢、-OH、-O-(C₁-C₄)烷基和-O-CO-(C₁-C₄)烷基；以及

R2和R3都是氢，或者一起形成亚甲基。

5.根据权利要求4的微生物体外转化的方法，其中所述的 9β，10α-类固醇类化合物具有通式(III)

其中

R1是氢或-O-(C₁-C₄)烷基；以及

R2和R3都是氢，或者一起形成亚甲基。

6.根据权利要求3至5任一项的方法，其中所述发酵的转化过程 是在需氧条件下进行的。

7.根据权利要求6的方法，其中所述发酵培养基的相对O₂饱和 pO₂/pO_2max为5％至95％。

8.根据权利要求6的方法，其中所述发酵培养基的相对O₂饱和 pO₂/pO_2max为20％至80％。

9.根据权利要求6的方法，其中所述发酵培养基的相对O₂饱和 pO₂/pO_2max为30％至75％。

10.根据权利要求6的方法，其中所述发酵培养基的相对O₂饱 和pO₂/pO_2max为40％至70％。

11.根据权利要求3至5任一项的方法，其中当通过向所述培养 基中添加9β，10α-类固醇类化合物开始所述转化时，所述的地中海拟无 枝酸菌细菌处于其指数生长期的中期或后期。

12.根据权利要求3至5任一项的方法，其中以50mg/l至500 mg/l的量加入所述的9β，10α-类固醇类化合物。

13.根据权利要求12的方法，其中以100mg/l至250mg/l发酵 培养基的量加入所述的9β，10α-类固醇类化合物。