[发明专利]连续酶膜反应制备马氏珠母贝降血压肽的方法

说明书

技术领域

本发明具体涉及一种活性多肽的制备方法，特别是连续酶膜反应制备马氏珠母贝降血压肽的方法。

背景技术

功能食品被称为二十一世纪的食品，其特有的功能就在于本身含有的活性成分对人体生理节律的调节，以达到预防或辅助治疗疾病、促进健康的目的。已确定的功能性食品基料中活性肽类已成为当今具有活力的功能食品研究和加工的新领域。降血压肽是一种重要的活性肽，由蛋白酶水解动植物蛋白制备。不同的蛋白酶、蛋白质及制备工艺，得到的降血压肽数量与活性有较大的不同。《水产科学》2006年第3期158-160页报道了利用水产蛋白质开发酶解降血压肽，发现从鱼肉、虾、蟹等水产动物蛋白质中制得的酶解降血压肽其降压活性优于其它食物性蛋白质。《食品与发酵工业》2006年第2期113-115页报道了马氏珠母贝肉ACEIP分离及提取的初步研究，用胃蛋白酶酶解马氏珠母贝肉得到的马氏珠母贝降血压肽，采用间歇方法酶水解，然后灭酶、超滤及层析分离，得到的活性肽对血管紧张素转化酶的抑制活性指标IC50为0.033mg/ml，但没有报道降血压肽的收率。

采用酶水解反应与膜分离耦合的酶膜反应器是提高活性肽收率的一种有效方法，因为蛋白酶水解蛋白质的过程为不可逆过程，随着水解过程的进行，肽链不断被切断，最后的产物为氨基酸。所以想得到某种氨基酸组合的肽，除了要选择合适的蛋白酶外，更重要的是及时把符合要求的肽通过膜从反应体系中分离出去，从而避免被酶继续分解，而分子较大的肽及蛋白酶留在反应器内继续反应，从而提高了产品收率及活性。《化学工程》2006年第4期43-46页报道了酶解反应与膜分离耦合连续制备酪蛋白磷酸肽，对间歇与连续酶解过程进行了比较分析，证明反应与分离耦合技术可使酶解效率及蛋白酶利用率大幅提高，但没有报道利用酶膜反应连续制备马氏珠母贝降血压肽的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种原料蛋白质收率高、降血压效果好的马氏珠母贝降血压肽的制备方法，其特征是采用碱性蛋白酶水解马氏珠母贝肉和酶膜反应器来制备马氏珠母贝降血压肽。

上述所说的碱性蛋白酶为地衣芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌所产生的蛋白酶。

上述所说的酶膜反应器为把酶解过程放在膜分离装置中实现的反应器，该反应器的膜组件的截留分子量为8-10KDa的管式陶瓷膜。

本发明的实现步骤及条件如下：

把马氏珠母贝肉粉碎制浆及加热变性，用水稀释到蛋白质含量为2-5％，用NaOH调整pH值为9-10，得到反应原料液；2、将反应原料液连续加入酶膜反应器，在操作温度为35-60℃、压力为0.3-0.5MPa、碱性蛋白酶浓度为0.2-2％下，同时进行反应与分离，水解完成液连续透过膜流出酶膜反应器；3、将水解完成液喷雾干燥，控制喷雾干燥的空气进口及出口温度分别为170-190℃和90-110℃，即得蛋白质水解收率为40～70％、IC50为0.3～0.6mg/ml的马氏珠母贝肉降血压肽产品。

本发明与已有的制备技术相比，其突出的实质性特点和显著的进步是：

(1)产品收率高，生产成本低，适合规模生产。

(2)产品的IC50值，没有经过复杂的分离，已经达到较低的数值，达到一般功能食品的要求。

(3)工艺简单，操作连续，投资少。

具体实施方式

实施例一

把马氏珠母贝肉粉碎制浆及加热变性，用水稀释到蛋白质含量为3％，用NaOH调整pH值为9，得到反应原料液；将反应原料液连续加入截留分子量为8KDa的酶膜反应器，在操作温度为45℃、压力为0.35MPa、地衣芽孢杆菌所产生蛋白酶的浓度为0.4％下，同时进行反应与分离，水解完成液连续透过膜流出酶膜反应器；将水解完成液喷雾干燥，控制喷雾干燥的空气进口及出口温度分别为180℃和100℃，即得蛋白质水解收率为40％、IC50为0.35mg/ml的马氏珠母贝肉降血压肽产品。

实施例二

把马氏珠母贝肉粉碎制浆及加热变性，用水稀释到蛋白质含量为4％，用NaOH调整pH值为10，得到反应原料液；将反应原料液连续加入截留分子量为10KDa的酶膜反应器，在操作温度为55℃、压力为0.45MPa、枯草芽孢杆菌所产生蛋白酶的浓度为1％下，同时进行反应与分离，水解完成液连续透过膜流出酶膜反应器；将水解完成液喷雾干燥，控制喷雾干燥的空气进口及出口温度分别为180℃和100℃，即得蛋白质水解收率为50％、IC50为0.39mg/ml的马氏珠母贝肉降血压肽产品。

实施例三

把马氏珠母贝肉粉碎制浆及加热变性，用水稀释到蛋白质含量为4％，用NaOH调整pH值为10，得到反应原料液；将反应原料液连续加入截留分子量为10KDa的酶膜反应器，在操作温度为50℃、压力为0.4MPa、地衣芽孢杆菌所产生蛋白酶的浓度为0.8％下，同时进行反应与分离，水解完成液连续透过膜流出酶膜反应器；将水解完成液喷雾干燥，控制喷雾干燥的空气进口及出口温度分别为180℃和100℃，即得蛋白质水解收率为50％、IC50为0.39mg/ml的马氏珠母贝肉降血压肽产品。