[发明专利]一种白腐真菌及其选育方法和应用无效
申请号: | 200710300037.6 | 申请日: | 2007-12-24 |
公开(公告)号: | CN101469312A | 公开(公告)日: | 2009-07-01 |
发明(设计)人: | 常东民;李市场;吴慧霞;茹群朵;左雪梅;王耀民;王娜;郭至瑞 | 申请(专利权)人: | 河南仰韶生化工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N15/01;C12N13/00;C12N9/02;C12R1/645 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈 浩 |
地址: | 472400河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 真菌 及其 选育 方法 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种白腐真菌(Trametes Versicolor)YS-L613,同时还涉及该菌株的诱变选育方法,特别涉及利用该菌株生产漆酶的方法。
背景技术
漆酶是一种氧化还原酶,其作用主要是催化氧化还原反应,因此漆酶能把分子氧直接还原为水,在没有过氧化氢和其它次级代谢产物存在下,可催化大量的酚类和芳香胺类化合物的氧化。一些漆酶能高效地氧化抗坏血酸,另外一些真菌漆酶还能催化木质素和甲氧基酚酸的脱甲基反应。漆酶作用的底物相当广泛,包括多酚、甲基替代单酚、芳香胺、苯硫醇、聚甲氧基苯,以及其他容易氧化的化合物,还有许多与对二酚结构类似的化合物,如氨基苯酚,邻、对苯二酚,多酚,多胺,木质素和芳基二胺等。由于具有相当广泛的底物专一性和较好的稳定性,漆酶在废水处理、生物漂白、芳香化合物转化、环境监测等方面具有重要应用价值。漆酶的抑制剂大多是铜离子螯合剂,有卤化物、半胱氨酸、EDTA和SDS等;离子强度的不同会影响酶的活力,不同来源的漆酶最适pH范围也会不同。漆酶的应用研究现主要集中于生物造纸、环境污染治理、食品工业应用、有机合成、生物及免疫检测等。对漆酶的研究早在上世纪60年代就己开始,已经从不同来源的微生物中分离到大量的不同类型、不同功能的漆酶。漆酶制浆造纸工业、食品工业、能源工业中都显示出广阔的应用前景。
漆酶是以农副产品为原料,经微生物纯种发酵提取而制得的一种新型酶制剂。漆酶也是继纤维素酶,木聚糖酶等新品种酶制剂开发之后的又一重要品种,是国家大力提倡发展的新型酶制剂产品之一。随着国民经济的持续健康发展,人民的生活水平的逐步提高对漆酶的需求越来越大,这是社会发展的需要,也是开展该项目研究的重要意义之一。第二,从目前国内酶制剂行业发展情况来看,漆酶研究虽起步较早,但发展缓慢。因此适时开发漆酶即可以提高竞争,有可以部分取代进口产品,满足国内市场需求。第三,该项目的研究开发对于调整工业生产结构具有重要作用。第四,发展漆酶的开发研制,不但可以满足国内市场的需求,而且可以出口国外,为国家创造大量的外汇,同时可以与纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶、糖化酶、果胶酶等配制成符合酶制剂,以满足不同行业的要求。目前如何获得大批量、低成本、高品质的漆酶已经成为制约和影响我国漆酶产业化发展的关键因素。而解决这个问题需要从两方面着手:菌种的选育及发酵工艺的优化。
目前,国内漆酶的研究大多还处在实验室阶段研发阶段,没有进入工业化规模生产,其根本的原因在于:一是菌种的产酶水平较低,经济效益差,无法进行工业化生产;二是菌种规模生产的工艺不成熟。
发明内容
本发明的目的在于提供一种白腐真菌(Trametes Versicolor)YS-L613。
同时,本发明的目的还在于提供一种白腐真菌(Trametes Versicolor)YS-L613的诱变选育方法。
另外,本发明的目的还在于提供一种利用白腐真菌(TrametesVersicolor)YS-L613生产漆酶的方法,以大大提高漆酶的产率。
为了实现上述目的,本发明的技术方案采用了一种白腐真菌(TrametesVersicolor)YS-L613,其由以下方法诱变选育而制得,以白腐真菌为出发菌株,采用以UV、60CO、紫外线、亚硝基胍、离子注入与微波处理相结合的复合诱变育种技术,选育出漆酶高产菌株YS-L613。
同时,本发明的技术方案采用了一种白腐真菌(Trametes Versicolor)YS-L613的诱变选育方法,以白腐真菌为出发菌株,采用以UV、60CO、紫外线、亚硝基胍、离子注入与微波处理相结合的复合诱变育种技术,选育出漆酶高产菌株YS-L613。
具体方法包括以下步骤:
(1)出发菌种,以白腐真菌YS菌株为出发菌种,4℃保藏于CPDA斜面;
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