[发明专利]一种改进的农杆菌介导浸花法转化禾本科作物的方法有效
| 申请号： | 200710178499.5 | 申请日： | 2007-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN101186926A | 公开（公告）日： | 2008-05-28 |
| 发明（设计）人： | 夏勉;张会新;凌莉 | 申请（专利权）人： | 北京未名凯拓农业生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/87 |
| 代理公司： | 北京君尚知识产权代理事务所 | 代理人： | 李稚婷 |
| 地址： | 100085北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改进 杆菌 介导浸花法 转化 禾本科 作物 方法 | ||
1.一种转化禾本科作物的方法，包括以下步骤：
1)将含有目的基因的农杆菌用渗透培养基悬浮，所述渗透培养基含有SilwetL-77、曲拉通X-100和赤霉素；
2)在活体条件下进行浸花法转化：将待转化的禾本科作物目的植株的全部花序或雌蕊部分浸泡于所述渗透培养基中，或者将所述渗透培养基喷洒于花序或雌蕊上，利用农杆菌将目的基因整合到目的植株基因组中。
2.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述渗透培养基中Silwet L-77的用量为50-500μl/L。
3.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述渗透培养基中曲拉通X-100的用量为50-500μl/L。
4.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述渗透培养基中赤霉素的用量为1-10μg/L。
5.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述含有目的基因的农杆菌的获得是将目的基因插入到表达载体中，再将该表达载体导入农杆菌中。
6.根据权利要求5所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述表达载体选自：pBin系列载体、pBI系列载体、Gateway系列载体、pCAMBIA系列载体。
7.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述农杆菌选自下列菌株：LBA4404、GV3101、EHA105。
8.根据权利要求1所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述步骤2)的转化过程每天进行一次，共重复三次，每次浸染后用硫酸钠纸袋将处理过的花序套住，纸袋于最后一次转化后的24hr后去掉。
9.根据权利要求1～8中任一权利要求所述的转化禾本科作物的方法，其特征在于：所述禾本科作物为甜高粱、谷子或玉米。
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