[发明专利]一种检测结核杆菌的试剂盒及其专用探针与引物有效
| 申请号: | 200710176866.8 | 申请日: | 2007-11-06 |
| 公开(公告)号: | CN101168779A | 公开(公告)日: | 2008-04-30 |
| 发明(设计)人: | 朱玉兰;吴兵;王佃鹏;高朝贤;黄宗炎;刘胜牙;叶健忠 | 申请(专利权)人: | 深圳国际旅行卫生保健中心 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;G01N21/64 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关畅 |
| 地址: | 518033广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 结核杆菌 试剂盒 及其 专用 探针 引物 | ||
1.一种检测结核杆菌的专用探针,其碱基序列如SEQ IN NO:3所示。
2.根据权利要求1所述的探针,其特征在于:所述探针的一端连接有荧光淬灭基团,另一端连接有荧光报告基团。
3.根据权利要求2所述的探针,其特征在于:所述探针的3’端连接有一个荧光淬灭基团TAMRA,5’端连接有一个荧光报告基团FAM。
4.一种检测结核杆菌的专用引物,由正向引物和反向引物组成,所述正向引物的碱基序列如SEQ IN NO:1所示,所述反向引物的碱基序列如SEQ IN NO:2所示。
5.一种检测结核杆菌的试剂盒,包括权利要求1、2或3所述的探针和权利要求4所述的专用引物。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括结核杆菌基因PCR扩增试剂。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于:所述PCR扩增试剂为2×Probe-PCR Master Mix。
8.根据权利要求6或7所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括结核杆菌标准品,该标准品包括阳性定量参考品、阴性质控品、临界阳性质控品和强阳性质控品,其中阳性定量参考品的浓度梯度为103、107、106、105copies/mL。
9.一种利用权利要求5所述的试剂盒检测结核杆菌的方法,是提取待测痰液DNA,并以其为模板,用权利要求5所述试剂盒进行荧光定量PCR检测。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于:所述实时荧光定量PCR的反应程序为:95℃ 15min,1个循环;94℃ 10s,60℃ 20s,72℃ 30s,40个循环。
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