[发明专利]叶酸改性壳聚糖亲核NO供体及其合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种医药工程技术领域的药物及其合成方法，具体是一种叶酸改性壳聚糖亲核NO供体及其合成方法。

背景技术

一氧化氮NO是内皮诱导松弛因子，在调节血管紧张度、血压、平滑肌繁殖和血小板聚集等方面有重要的作用。目前，NO在损伤部位处的控制释放已经被确定是防止再狭窄的最有前途的一种途径。有效治疗心血管疾病患者的举措是使用抗凝血制剂和抗血小板制剂，这些制剂能够防止更深入缺血事件的发生和减少由血栓导致相关动脉疾病死亡的概率。含有亲核一氧化氮供体[N(O)NO]^-官能团的化合物是近几年发展起来的一种最重要的NO供体药物，它既可在生理条件下自发的释放NO分子，经O₂取代后又可在靶器官和靶细胞中被特定酶脱离，具有靶向性的功能，它还具有良好的可调控性，另外它可制备成各种形态，根据需要应用于不同的医学领域。虽然大量的体外试验已经证明了它可有效的预防成型术后再狭窄，提高医疗装置的抗血栓性能，减轻肺部高压和血管痉挛然等用途，但亲核试剂(多胺)的细胞毒性和致癌性副产物亚硝胺的生成是限制其临床应用的主要难题。

在最近的十年中，国外对基于含有[N(O)NO]^-官能团的NO供体控释材料进行了大量的研究。最初的研究集中于将离子型的亲核NO供体NONOate分散于各种疏水性聚合物中，通过NO的释放增强这些材料的血液相容性。但亲水性的NO供体会从聚合物中渗出，在血液中形成致癌性的N-亚硝胺物质。将这类材料应用于临床，还必须考虑作为聚合物基体材料的生物相容性和生物可降解性、亲核试剂的细胞毒性和生物相容性。因此要选用无毒的有良好生物相容性的NO载体，其中的解决办法之一就是采用对身体无害的具有仲胺基团的亲核载体。

叶酸(FA)是一种B族维生素，可特异性地与细胞表面的叶酸受体(FR)作用形成复合物，通过受体介导内吞被细胞吸收且顺利到达细胞核。FR可被许多肿瘤细胞超量表达(如卵巢癌、子宫内膜癌、直肠癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、神经内分泌癌和脑转移癌等)，叶酸已被当作抗癌药物的靶向分子而受到广泛重视。

壳聚糖是唯一天然存在且是阳离子的可生物降解的多糖，具有良好的生物相容性和生物可降解性，有抗菌消炎、促进伤口愈合、抗酸抗溃疡及直接抑制肿瘤细胞的作用，与抗癌药合用可增强抗癌效果。近年来壳聚糖作为一种新型药用辅料在缓释给药系统中得到了越来越广泛的应用，且壳聚糖来源丰富，价格低廉。另外，由于壳聚糖具有良好的生物相容性，生物可降解性，大分子正电性，无毒性以及生物粘附性，使得壳聚糖可以作为理想的药物输送材料。

经对现有技术的文献检索发现，Smith等人在美国专利中(USP6261594，Chitosan-based nitric oxide donor compositions，2001；USP6451337，Chitosan-based nitric oxide donor compositions，2002)提出了将改性壳聚糖作为亲核NO载体，合成出系列壳聚糖-NO加成物。壳聚糖的具体的改性分为两类：(1)亲水基团改性：N-羧丁基壳聚糖，N-羧乙基壳聚糖，N-羧甲基壳聚糖。(2)疏水性基团改性：N-丙基壳聚糖，N-羧乙基壳聚糖甲酯。其不足在于NO的负载程度较低，原因有两点：(1)NO的释放不具有针对性，使得NO的利用度极地低。(2)这些壳聚糖改性产物同NO的反应后生成的亲核NO供体的释放量和释放半衰期较低。因此限制了其在医学上的用途。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种叶酸改性壳聚糖亲核NO供体及其合成方法。本发明通过对壳聚糖进行羧基化改性，产生NH亲核位点，同NO反应后，得到一系列以壳聚糖叶酸改性产物为载体的含有[N(O)NO]^-官能团的新型的NO供体，解决了目前此类亲核NO供体应用于临床时存在的问题(利用率较低)。

本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明所涉及的叶酸改性壳聚糖亲核NO供体，用壳聚糖作为基体材料，采用羧化改性产生仲胺亲核位点(NH基团)，与NO反应产生[N(O)NO]^-官能团，亲核NO供体的结构式如下：

其中N[N(O)NO]^-基团为NH基团同NO反应形成。而NH基团来自于叶酸改性的壳聚糖和叶酸分子本身；叶酸分子本身就具有NH集团，而且叶酸分子上的羧基基团-COOH跟壳聚糖上的NH₂基团发生羧基反应后就可以直接生成NH基团。