[发明专利]一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及深海鳕鱼的深加工，具体地说是一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原的方法。

背景技术

鳕鱼皮是加工鳕鱼片过程中剔出的16％～20％余料成为废弃物，鳕鱼皮中含有较高的螺旋胶原，而且这种胶原的活性及可溶性很强。具有促进人体细胞组织代谢生长，富于结缔组织营养，增强肌肤弹性、保持水份、减少皱痕。并能承载无机质输送到人体各器官，增强细胞和骨髓生理功能。目前，国际有关科研部门为了得到更安全的胶原材料，更加重视从鱼皮和其它海洋物质中萃取胶原和活性物质。经研究，采用海洋生物技术从鳕鱼皮中萃取螺旋胶原是一种新的生物资源利用，为胶原材料生产提供新的途径。

发明内容

本发明的目的是提供从深海鳕鱼皮中萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法，使废弃的鳕鱼皮中的活性物质得到更广泛的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种用深海鳕鱼皮萃取螺旋胶原冻干粉的制备方法：

1.深海鳕鱼皮的预处理

1.1 深海鳕鱼皮的选择：在对鳕鱼加工时，收集新鲜的鳕鱼皮在0℃～-18℃条件贮存；

1.2 将新鲜或冰冻的鳕鱼皮，用2℃～8℃食用水浸泡8～18小时，铺在冰块上剔除鱼皮下组织，清洗干净；再将鳕鱼皮置于不锈钢槽内，加入鱼皮重量的3～5倍纯净水，水温控制在2℃～8℃，并向水中充入压缩空气，压力控制在0.1～0.4Mpa，在小槽内产生气泡，维持4～10小时，捞出鳕鱼皮淋干；

1.3将清洗淋干的鳕鱼皮，置于真空的不锈钢生化罐内，加入0.8％～1.8％Ca(OH)₂溶液；

鱼皮与Ca(OH)₂溶液的重量比例为1:6～12，温度控制在2℃～8℃，真空度为100pa～200pa，时间为24～48小时；然后在循环中向罐内加入纯净水冲洗，直到PH值7左右；

1.4冰冻处理：将真空浸渍的鳕鱼皮卷成直径8～10cm，长30cm的鳕鱼皮卷，置于—18℃～—30℃的速冻室内冰冻，冻透后取出，采用电动刨肉机将鳕鱼皮卷均匀的刨成0.5～5.0mm的薄片，溶于纯净水中。鳕鱼皮片与纯净水的重量比例为1:3～6，搅拌均匀后，加入胶体磨中打成浆状备用。

2.生物酶解

2.1 复合酶解：将预处理后的鳕鱼皮浆，置于真空生物反应釜内，控制温度为8℃～18℃，PH值为6～8，每千克鳕鱼皮体加2～4g的复合蛋白酶(丹麦诺维信功能食品工业生产Protamex)，2～3g1398中性蛋白酶，2～3g1203脂肪酶，2～4g乙酸盐，2～4g的Vc作为酶激活剂；真空度控制在100～300pa，搅拌下酶解反应12～20小时，然后用100～300目的双联过滤器分离出杂质；在复合酶解反应下，使鳕鱼皮组织细胞被降解，三螺旋胶原分子链被酶切下来，得复合胶原酶解液；

2.2 生物酶修饰：经酶降解液体内胶原分子与蛋白酶形成复合体，为使三螺旋结构的胶原从蛋白酶中分离得到降酶。将复合胶原酶解液用压缩空气输送至生物酶修饰反应釜中，调整PH值为6～8，温度为8℃～18℃，加入鳕鱼皮质量0.3～1.8g/Kg的复合风味蛋白酶(丹麦诺维信功能食品工业生产的Flavourzyme)，0.2～1.2g/Kg的磷脂酯酰基水解酶(俗称：磷脂酶A)，真空度控制在200pa～600pa，搅拌酶修饰反应8h～20h，得三螺旋胶原酶解液；

2.3 灭酶：三螺旋胶原酶解液在高温区不稳定，为此不能采用高温灭酶。将三螺旋胶原酶解液通过紫外线灭酶，温度控制在8℃～18℃，时间为20～30min，灭酶。

3.螺旋胶原分离纯化

3.1 离心分离：采用高速蝶式离心机将灭酶后的螺旋胶原液以10000～30000r/min的速度分离5～15min，将上层液和中层液合并输入稀释罐内，即得螺旋胶原液，下层液被分离出去；

3.2 稀释：将分离螺旋胶原液按1:3重量比例加入蒸馏水或纯净水，在真空度100pa～300pa搅拌成稀释液；

3.3 超微膜纯化：将螺旋胶原液用循环泵在0.3Mpa～0.8Mpa压力下通过0.4um～1.0um的微滤和100000道尔顿的超微膜纯化，获得分子量小于等于100000道尔顿的螺旋胶原液；

3.4 反渗透膜浓缩：将螺旋胶原纯化液，通过1000道尔顿的反渗透膜进行浓缩，除去总重量70％或70％以上的水分子，获得30％或30％以下的螺旋胶原浓缩液。

4.冷冻干燥