[发明专利]一种编码β－葡萄糖苷酶的基因

权利要求书

1.一种编码β-葡萄糖苷酶的基因(unbgl1B)，其核苷酸序列从序列表中的序列1的5’端第141位核苷酸开始到第824位核苷酸结束；其中，起始密码子GTG为自5’端的第141位至第143位核苷酸，终止密码子TAG为自5’端的第822位至第824位核苷酸；所述unbgl1B基因的GC含量为54.3％。

2.含有权利要求1所述基因的DNA序列的表达载体。

3.一种生成葡萄糖的方法，包括：将纤维二糖D-(+)-Cellobiose经权利要求1所述基因编码的蛋白Unbgl1B的催化合成所述葡萄糖；所述合成具体包括以下步骤：

(a)将混合好的作用体系置于32℃恒温培养箱内；

(b)待30min后取出，经离心处理，用滤膜过滤后取上清液用作检测；

(c)反应完毕的作用体系于-20℃条件下保存；

(d)对所述纤维二糖在所述蛋白Unbgl1B催化作用下的合成产物进行分析，采用的分析仪器有HPLC-色谱仪、R401示差检测器和碳水化合物柱4.6×250mm，均为美国Waters公司生产；色谱条件为流动相乙腈/水，流量为1.0mL/min，进样量为10微升；

所述作用体系为：10mg/mL纤维二糖D-(+)-Cellobiose，2mM MgCl₂，加入0.1ml的pH 7.0的0.2mol/l的Na₂HPO₄-Critic acid缓冲液，加入所述蛋白Unbgl1B 25-50μg，最终补充双重蒸馏水至5mL。