[发明专利]一种化合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物，还涉及该化合物的制备方法。 

背景技术

脂类化合物在生理上具有非常重要的意义，如脂肪在体内氧化时放出大量热量，作为能源的储备物；它在脏器周围能保护内脏免受外力撞伤；在皮下有保温作用。脂肪还是维生素A，D，E和K等许多活性物质的良好溶剂。类脂是组织细胞的重要成分，它们在细胞内和蛋白质结合在一起形成脂蛋白，构成细胞的各种膜，如细胞膜和线粒体膜等。脂类化合物主要来源于动植物，不能在人体内合成，必须由食物供给，从微生物代谢产物中获取甚少，特别是多节孢霉菌(Nodulisporium)发酵途径获取亚多节孢酯天然化合物也未见过报道。 

发明内容

本发明的目的提供一种化合物，可采用小型真菌多节孢霉菌(夏瀚多节孢霉，Nodulisporium Xiahanensis nov.Xia)经液态发酵纯培养制备方法获得。 

本发明另一个目的是提供该化合物的制备方法。 

本发明的目的是通过下列技术措施实现的： 

一种化合物，其名称为6，9-十七碳二烯酸-3-亚油酸甘油酯(6，9-heptadecadienoyl3-linoleoyl glycerin ester)，命名为亚多节孢酯(linodulisporate)。亚多节孢酯为新的化合物，属于人体必需脂肪酸脂类物质。亚多节孢酯是一个脂类化合物，其由2条碳链(17碳2烯酸)构成的多不饱和亚油酸连接一个甘油酯而形成。 

分子式：C₃₈H₆₆O₅，分子量：M＝602。 

结构式为： 

该化合物为黄色，油状粘稠物，带有香味或特殊的气味。相对密度在0.9-0.95之间。难溶于水，易溶于有机溶剂，如热乙醇，乙醚、石油醚、氯仿、四氯化碳和苯等。该化合物也 具有水解、皂化及酸败反应的特性。 

用于制备所述化合物的菌株属小型真菌多节孢霉(Nodulisporium)，该菌分离自中国浙江省西南庆元县百山祖自然保护区的土壤中，菌株编号ZJX-0508，根据形态观察、培养特征和分子生物学分析，可视为一个新种，命名为夏瀚多节孢霉(Nodulisporium Xiahanensis nov.Xia)，已保藏于武汉中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址为武汉市武昌珞珈山武汉大学)，保藏编号为CCTCC No M 207137，保藏日期为2007年9月3日。 

本发明所述的化合物的制备方法，包括下列步骤： 

a.发酵菌株采用保藏编号为CCTCC M207137的菌株； 

b.菌株培养：将发酵菌株接种在固体培养基上，单菌落涂布，25～32℃培养4～10天；收集菌株的孢子；将菌株的孢子接种于种子培养基，100～250rpm，25～32℃发酵培养24～32小时，得种子液；将种子液按发酵培养基体积3～10％的接种量接种于发酵培养基，200～300rpm，25～32℃发酵培养40～72小时，收集发酵液； 

c.发酵产物提取：将发酵液与低极性溶剂在提取罐中搅拌30～120min后静置分层，弃下层水相及中层乳浊相，上层有机相在浓缩罐中，浓缩至无法浓缩为止，即得粗品； 

d.目标产物纯化：发酵提取物上柱层析，用石油醚、乙酸丁酯与无水乙醇混合溶液或石油醚与乙酸乙酯混合溶液进行洗脱，收集洗脱液，即得。 

其中所述的培养基各组分在培养基中按重量体积比(g/ml)计，碳源2～10％，氮源2～5％，无机盐0～1％，其中固体培养基需加入1.5～3％的琼脂，其余为水。优选为碳源4～7％，氮源3～4％，其中固体培养基需加入2～2.5％的琼脂，其余为水。 

其中所述的碳源选自淀粉水解糖、糊精、甘油、糖蜜、葡萄糖、蔗糖、淀粉类、土豆汁、麦芽汁、豆汁、土豆浸出粉、燕麦中的一种或几种，优选蔗糖。所述的氮源选自黄豆饼粉、玉米浆、蛋白胨、鱼胨、蚕蛹水解液、尿素、铵盐、酵母浸出物、黄豆粉、棉籽粉、氨水、硝酸盐中的一种或几种，优选黄豆饼粉。所述的无机盐选自氯化钠、氯化镁、氯化锰、氯化钾、氯化钙、磷酸二氢钾、硫酸亚铁、硫酸镁、硫酸锰中的一种或多种，优选硫酸镁。经过试验，确定本发明化合物为胞外产物，经分析其可能结构为亲酯性化合物，根据低成本、易浓缩、方便后处理的原则，选择了石油醚、乙酯、乙醇、己烷、庚烷等低极性溶剂进行试验，最终优选石油醚为最佳萃取溶剂，其加入量与发酵液体积比为0.8∶1。萃取粗提物颜色相对较浅、单位富集，且易浓缩，溶剂用量少、成本低。