[发明专利]提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液

说明书

技术领域

本发明涉及环境样品免疫检测技术领域中一种提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液。

背景技术

基质(Matrix)是指一种分析物(Analyte)的环境(Milieu)，即指样品中除了目标分析物以外的一切成份及其物理、化学性质(例如粘度、pH、温度等)。

基质效应(Matrix Effect)在医学上按临床及实验室标准化组织的定义是指：(1)样品中除分析物以外的其他成份对分析物测定值的影响；(2)基质对分析方法准确测定分析物的能力的干扰。

环境样品中的各种基质与其它样本中(如医学上的血液样品)的基质有着较大的不同，这是环境样品免疫检测技术非常重要的特点之一。为了能实现对水样进行直接的免疫检测，减少或省略预处理步骤，因此，有必要考察水中的各种基质对免疫检测的影响，做出全面的评价，并对不利的影响和干扰提出解决方案，以保证免疫检测的稳定性、重复性和可靠性。

目前，环境样品的免疫检测研究中，有关环境样品中复杂基质对免疫检测的干扰规律以及对干扰的消除方法等尚未开展起来。而这些对保证免疫检测的稳定性、重复性和可靠性十分关键。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液。

本发明所提供的缓冲溶液，是在现有的浓度为0.05-0.12mol/L、pH为7.0-8.0的缓冲液中，加入下述a)、b)和c)的物质：

a)NaCl，使其终浓度为10-100g/L；

b)惰性蛋白或明胶，使其终浓度为2-20g/L；所述惰性蛋白是不与免疫反应体系发生反应的蛋白；

c)乙二胺四乙酸二钠，使其终浓度为2-20g/L。

所述现有的缓冲液具体可为磷酸盐缓冲液。

所述惰性蛋白包括但不限于牛血清白蛋白、鸡蛋白蛋白和兔血清白蛋白。

其中，所述NaCl的浓度优选为50g/L。

所述惰性蛋白或明胶的浓度优选为10g/L。

所述乙二胺四乙酸二钠的浓度优选为5g/L。

本发明所提供的提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法，是在环境样品免疫检测中，将上述任一种环境样品免疫检测专用缓冲溶液作为缓冲体系，进行境样品的免疫检测。

本发明的提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液可用于各种环境样品(如水样)的免疫检测中，可有效地减小或消除来自环境样品(如水样)中各种复杂基质在其自然界存在的边界范围内给免疫检测带来的干扰，使实际环境样品免疫检测的稳定性增强。

本发明的提高环境样品免疫检测抗基质效应的方法及其专用缓冲溶液能应用在环境样品各种免疫检测技术上，包括环境样品的酶联免疫吸附试验试剂盒(ELISAkit)、环境样品胶体金试纸检测、环境样品免疫传感器/抗体芯片(免疫芯片，抗体阵列)等检测技术方面，能显著提高上述免疫检测技术的稳定性和一致性。

附图说明

图1为添加普通缓冲液的不同pH值条件下的ELISA标准曲线

图2为图1标准曲线的最大吸光度A₀和IC₅₀的比较

图3为添加专用缓冲液1的不同pH值条件下的ELISA标准曲线

图4为图3标准曲线的最大吸光度A₀和IC₅₀的比较

图5为添加普通缓冲液的不同硬度下的ELISA标准曲线

图6为图5标准曲线的最大吸光度A₀和ICX₅₀的比较

图7为添加专用缓冲液1的不同硬度下的ELISA标准曲线

图8为图7标准曲线的最大吸光度A₀和IC₅₀的比较

图9为添加普通缓冲液的不同腐殖酸浓度下的ELISA标准曲线

图10为图10标准曲线的最大吸光度A₀和IC₅₀的比较

图11为添加专用缓冲液1的不同腐殖酸浓度下的ELISA标准曲线

图12为图11标准曲线的最大吸光度A₀和IC₅₀的比较

图13为添加普通缓冲液的不同CuSO₄浓度下ELISA标准曲线

图14为添加普通缓冲液的不同CuSO₄浓度下A₀和IC₅₀值的变化