[发明专利]一种利尿镇痛的药物

说明书

技术领域

本发明涉及中药领域，具体地，涉及一种从土茯苓中提取的利尿镇痛药物其制备方法和用途。

背景技术

土茯苓是百合科植物光叶菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根茎，又称禹余粮、白余粮、冷饭团等。商品中所用土茯苓大多为赤土茯苓。味甘、淡、平；归胃、肝经。土茯苓具有除湿、解毒、通利关节之功效，用于治疗梅毒、筋骨挛痛、肾炎水肿、淋浊、带下、湿热疮毒、痈肿、瘰疬等。

落新妇苷(astilbin)是土茯苓中含有的一种二氢黄酮醇苷类化合物。现代药理学研究表明，落新妇苷能明显增加大白鼠的排尿总量，且有剂量-反应关系，给药后1h能增加尿Na⁺排出量，但对尿K⁺排出没有明显改变[吴丽明，张敏.土茯苓中落新妇甙的利尿和镇痛作用。中药材，1995；18(12)：627]。除此以外，其还具有抑制醛糖还原酶、保肝、抗氧化、改善免疫性肝损伤等作用。

以往对于土茯苓的报道主要集中在复方的研究方面，对于针对土茯苓药物本身几乎没有报道。

发明内容

本发明的主要目的在于，克服现有技术中的不足，提供一种从中药土茯苓中提取的药物。

本发明的另一目的在于提供了上述药物的制备方法。

本发明的又一目的在于提供了含有这种药物作为活性成分的药物组合物。

本发明的又一目的在于提供了上述药物组合物制备方法。

本发明的又一目的在于提供了这种药物在制备利尿镇痛药物中的应用。

本发明药物是通过下述方法制备而成，包括下述步骤：

a.将土茯苓药材粉碎，用70％～95％的乙醇回流提取，将所得提取液浓缩成浸膏；

b.将步骤(a)中所得浸膏用水混悬后，用乙酸乙酯萃取；

c.将步骤(b)中所得乙酸乙酯萃取物浓缩后进行硅胶柱层析，洗脱液进行洗脱，薄层色谱检测跟踪，合并洗脱液，浓缩得到本发明药物I。

其中，在步骤a中提取药材所用的乙醇浓度为70％～95％，优选70％的乙醇；其用量是所用药材的6-20倍，优选10倍；药材回流提取的次数为1-4次，优选3次；提取时间为0.5-3小时，优选1.5小时。

在步骤b中乙酸乙酯萃取的次数可以是1-6次，优选4次。

在步骤c中硅胶为200～300目；洗脱液为二氯甲烷、乙酸乙酯和甲酸的混合液，它们的体积比为500：500：0.5～100：900：0.5，优选为333：666：0.5；采用薄层色谱检测跟踪含有落新妇苷的流份，其薄层条件为：选用硅胶G为固定相，流动相为二氯甲烷：乙酸乙酯：甲酸(200：800：0.5)。

上述方法得到的本发明药物I中落新妇苷的含量高。为了便于理解，我们采用归一化法，按照《中华人民共和国药典》2005版一部高效液相色谱法对本发明药物I进行测定，其落新妇苷的含量达80％以上。

具体测定方法如下：

待测样品：按照实施例1的方法进行制备。

色谱条件：Agilent1100高效液相色谱仪；色谱柱：YMC-Pack ODS-A(4.6×250mm)；流动相：乙腈-0.05％磷酸(18：82)；检测波长：290nm；柱温：25℃；进样量：10μL。

按峰面积照归一化法计算，落新妇苷的含量为82％。HPLC谱图见附图1。

上述方法还可以包括精制步骤d。

d.将前述方法所得到的药物进行第二次硅胶柱(200～300目)层析，以氯仿：甲醇(8：1～4：1)洗脱，浓缩，放置，析出黄色结晶，再经重结晶，得本发明药物II。

其中，步骤d中所用洗脱剂是氯仿：甲醇，体积比为8：1～4：1之间，优选氯仿：甲醇为6：1～5：1；重结晶所用有机溶剂可以为乙醇、甲醇、乙酸乙酯或者氯仿与甲醇的混合溶液，优选为氯仿：甲醇(6：1)；重结晶的次数可以是1-4次，优选2次。

上述方法得到的本发明药物中落新妇苷的含量高。为了便于理解，我们按照《中华人民共和国药典》2005版一部高效液相色谱法进行对本发明药物II进行了测定，其中落新妇苷的含量达95％以上。具体测定方法如下：

待测样品：按照实施例7的方法进行制备。

色谱条件：Agilent1100高效液相色谱仪；色谱柱：YMC-Pack ODS-A(4.6×250mm)；流动相：乙腈-0.05％磷酸(18：82)；检测波长：290、254和330nm；柱温：25℃；进样量：10μL。

按峰面积照归一化法计算，落新妇苷的含量为95％以上。HPLC谱图见附图2。