[发明专利]一种纳米组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明为一种新型给药系统载体材料小麦醇溶蛋白与水飞蓟宾制成的肝靶向纳米组合物。涉及生物材料，生物医学工程与新药研究领域。

背景技术

水飞蓟宾(Silybin，SN)是由菊科植物水飞蓟Silybum Marianum L.果实中提取得到的水难溶性黄酮类化合物。药理实验证明，水飞蓟宾对多种肝脏毒物引起的肝脏损伤有明显的保护作用。其靶器官为肝脏，进入体内后主要与血浆蛋白结合，以结合型水飞蓟宾的形式存在于血浆、胆汁及尿液中(史向国，钟大放，张逸凡，等.反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中水飞蓟宾的浓度[J].沈阳药科大学学报，2001，18(2)：113)。对急慢性肝炎、肝硬化和代谢中毒性肝损伤具有较好的疗效(宋立人，洪恂，丁绪亮，等.现代中药学大辞典.北京：人民卫生出版社，2001，496-498)。

由于水飞蓟宾难溶于水及一般有机溶剂，口服吸收差，其生物利用度较低，从而影响了其临床疗效。目前，以水飞蓟宾为有效单体的治疗药物剂型有口服制剂：水飞蓟素片、益肝灵片、水飞蓟宾卵磷脂复合物硬胶囊等。商品名有：利肝隆，利加隆，益肝灵等。注射剂：主要是做成水飞蓟宾衍生物，如：葡-N甲胺盐，二乙胺盐，N，二甲基甘氨酸盐，玻璃酸酶铀盐等或制成包合物再做成水溶性注射剂。在我国，生产水飞蓟宾制剂有几十年的历史，常见的剂型主要为片剂、胶囊等，因此对于该有效单体的新剂型开发前景广阔。

微粒制剂的研究已经成为当今药剂学研究的一个热点。而微粒制剂靶向给药系统的载体材料以天然的高分子材料，尤其是天然蛋白质类高分子材料更具研究价值。蛋白类高分子均易于代谢，但近年来，由于动物来源的蛋白高分子材料可能携带病毒，因此植物来源的高分子蛋白材料就显示出更大的优势，例如能够包埋多种活性物质、不会被病毒或朊病毒(prion)污染、具有药理惰性和无毒等特点，而且植物来源的多糖和蛋白质有望成为合成聚合物的优良替代品(徐晖，姬雅菊，王绍宁，等.聚合物纳米颗粒的制备及其应用(II)利用合成聚合物或天然大分子制备纳米颗粒.中国药剂学杂志，2004，2(4)：91-99)。

植物蛋白包括植物白蛋白、球蛋白、醇溶谷蛋白和谷蛋白4种，与动物蛋白相比，植物蛋白更易于分离纯化、价格也更低廉。醇溶蛋白是从谷类植物贮存蛋白中以适当浓度乙醇提取的分子量在100kD～30kD的一组蛋白质。具有较多的中性和亲脂性基团，除在极端pH值条件下醇溶蛋白在水中溶解度极低。其主要组成是约40％的谷氨酸和14％的脯氨酸，几乎没有带电荷的氨基酸。国内外对于醇溶蛋白的研究仅限于谷物育种、面包品质等农学与食品科学领域。国外药剂学方面对于醇溶蛋白作为药物载体的研究也较少。根据醇溶蛋白的性质决定其可以通过去溶剂化法制备成纳米粒，在整个制备过程中仅仅使用乙醇，而没有引入其他有机溶剂，大大降低生产成本，有效的解决了微粒制剂有机溶剂残留的问题，并为其工业化提供了保证。另外，醇溶蛋白来源丰富，容易分离提纯，并且有很好的生物相容性，经体外试验证明没有细胞毒性。研究表明，由于其内部的H键及S-S键而呈折叠状二级结构，醇溶蛋白所形成的肽泡状药物载体与肠上皮细胞，肝细胞以及皮肤角质细胞具有一定亲和性，可以作为转染试剂(载体)，能够将药物运输到细胞内，提高药物作用效果(Teglia，A.，Secchi，G..Newprotein ingredients for skin detergency：relative wheat proteinsurfactant complexes.Int.J.Cosmet.Sci.，1994，16：235-246)。另外，由于其表面大量的活性基团可以偶联特异性抗体，识别抗原，达到胞内靶向给药的目的。

国内外文献检索结果表明还未发现利用醇溶蛋白载体材料包裹水飞蓟宾制成纳米制剂的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供了一种具有肝靶向的纳米组合物，此纳米组合物是由小麦醇溶蛋白与水飞蓟宾共同制成，可提高药物的包封率和载药量，同时解决了水飞蓟宾水难溶性问题，具有肝脏靶向性，提高水飞蓟宾的临床疗效。

本发明进一步提供了小麦醇溶蛋白与水飞蓟宾的纳米组合物的冻干粉针剂，并提供了相应的制备方法。

本发明所述的纳米组合物是水飞蓟宾以单体形式包裹并吸附于小麦醇溶蛋白形成的，其中治疗性成分水飞蓟宾的质量百分含量为2％～20％，该纳米组合物的粒经大小为50～500nm。