[发明专利]系统置换多聚酶链反应有效
| 申请号： | 200710107828.7 | 申请日： | 2007-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN101063159A | 公开（公告）日： | 2007-10-31 |
| 发明（设计）人： | 江洪;江必胜;廖同兵 | 申请（专利权）人： | 北京万达因生物医学技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张涛 |
| 地址： | 100085北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 系统 置换 多聚酶链 反应 | ||
【权利要求书】：
1.系统置换多聚酶链反应，其特征在于通过待测模板-指示模板杂交连接酶反应，将待测PCR扩增置换成包括一套以上的指示PCR系统的扩增，包括如下步骤，(1)将与待测模板无关的指示模板两端加上部分待测模板基因保留序列形成指示模板加首尾DNA；(2)指示模板利用所加首尾与待测模板中不同区域保留序列互补杂交，(3)通过T4或Taq连接酶反应连上指示模板首尾缺口形成环状指示模板；(4)通过反向PCR扩增环状指示模板。
2.根据权利要求1所述的系统置换多聚酶链反应，所述待测模板为双链DNA、单链RNA或DNA-RNA杂交双链，所述单链RNA包括mRNA，所述待测模板保留序列长度为20-200bp。
3.根据权利要求2所述的系统置换多聚酶链反应，所述待测模板保留序列长度为30-50bp。
4.根据权利要求1所述的系统置换多聚酶链反应，所述指示模板为双链DNA，序列长度为80-1000bp。
5.根据权利要求4所述的系统置换多聚酶链反应，所述指示模板序列长度为80-150bp。
6.根据权利要求1所述的系统置换多聚酶链反应，其特征在于该反应还包括荧光分子信标，所述荧光分子信标序列与待测模板保留序列杂交或与指示模板序列杂交。
7.权利要求1-6任一所述系统置换多聚酶链反应在基因点突变和大片段变异检测中的应用。
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