[发明专利]异戊酰螺旋霉素I基因工程菌株的构建无效
| 申请号： | 200710090507.0 | 申请日： | 2007-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN101054553A | 公开（公告）日： | 2007-10-17 |
| 发明（设计）人： | 武临专;王以光;马春燕;赫卫清;周红霞 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医药生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N1/00 | 分类号： | C12N1/00;C12N15/54;C12N15/09;C12P19/62 |
| 代理公司： | 北京华科联合专利事务所 | 代理人： | 杨厚;王为 |
| 地址： | 1000*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 异戊酰 螺旋 霉素 基因工程 菌株 构建 | ||
【权利要求书】：
1、异戊酰螺旋霉素I基因工程菌株的构建，其特征是在必特螺旋霉素产生菌中通过破坏编码3-O-酰基转移酶基因，以获得产生异戊酰螺旋霉素I为主组分的基因工程菌。
2、如权利要求1所述的构建方法，其特征是以3-O-酰基转移酶基因序列为模板，在3-O-酰基转移酶基因序列中可以破坏该基因的任意区段设计4个引物，并插入4个任意设计的酶切位点，经PCR获得两个1.0kb左右的同源臂，酶切后将两个同源臂互连，另外两侧与能转入必特螺旋霉素产生菌的载体相连接，获得重组载体，并转入必特螺旋霉素产生菌，以载体上的选择性标记挑取转化子，通过筛选抗性标记和PCR验证，获得3-O-酰基转移酶基因被破坏的变株，经发酵及对产物提取后HPLC分析，证明所获变株为主要产生异戊酰螺旋霉素组分I的菌种。
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