[发明专利]可溶性CTLA4突变体分子及其应用

权利要求书

1. 一种融合蛋白，其包含在以下区段具有一个或多个突变的CTLA4细胞外结构域：

i)始于+25位的丝氨酸、止于+33的精氨酸的氨基酸序列(S25-R33)；和/或

ii)始于+97的蛋氨酸、止于+107的甘氨酸的氨基酸序列(M97-G107)。

2. 权利要求1的融合蛋白，其中所述突变为以下氨基酸的取代：S25、A29、T30、E31、R33、Y103、L104和G105。

3. 权利要求2的融合蛋白，其中所述氨基酸取代选自L104E和L104D。

4. 权利要求2的融合蛋白，其中所述氨基酸取代选自L104EA29L、L104EA29W和L104EA29T。

5. 权利要求1-4任一项的融合蛋白，其还包含CTLA4细胞外结构域的溶解性、亲和性或效价改变的氨基酸序列。

6. 权利要求1-4任一项的融合蛋白，其还包含免疫球蛋白部分。

7. 权利要求6的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分为免疫球蛋白恒定区或其部分。

8. 权利要求7的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白恒定区包括免疫球蛋白分子的铰链区、CH2区和CH3区。

9. 权利要求7或8的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白恒定区或其部分为人或猴免疫球蛋白恒定区或其部分。

10. 权利要求6-9任一项的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包含一个或多个降低效应子功能的突变。

11. 权利要求6-10任一项的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包含铰链区而且铰链区中任一或所有半胱氨酸残基被丝氨酸取代。

12. 权利要求11的融合蛋白，其中+130位的半胱氨酸被丝氨酸取代，+136位的半胱氨酸被丝氨酸取代，+139位的半胱氨酸被丝氨酸取代，如图8或9所示。

13. 权利要求7-12任一项的融合蛋白，其中所述人免疫球蛋白恒定区发生突变后包含了以下突变：+130位的半胱氨酸被丝氨酸取代；+136位的半胱氨酸被丝氨酸取代；+139位的半胱氨酸被丝氨酸取代；+148位的脯氨酸被丝氨酸取代，如图8或9所示。

14. 权利要求6-13任一项的融合蛋白，其中所述免疫球蛋白部分包括始于+126位的谷氨酸、止于+357位的赖氨酸的氨基酸序列，如图8或9所示。

15. 权利要求6-14任一项的融合蛋白，其还包含位于止于+124位天冬氨酸的氨基酸序列和免疫球蛋白部分之间的接点氨基酸残基。

16. 权利要求15的融合蛋白，其中所述接点氨基酸残基是谷氨酰胺。

17. 权利要求1的融合蛋白，其包含如图8所示的始于+1位蛋氨酸、止于+357位赖氨酸的氨基酸序列，或者如图8所示的始于-1位丙氨酸、止于+357位赖氨酸的氨基酸序列。

18. 权利要求1-17任一项的融合蛋白，其还包含允许分泌所述融合蛋白的氨基酸序列。

19. 权利要求18的融合蛋白，其中所述氨基酸序列包括制癌蛋白M信号肽。

20. 权利要求1-19任一项的融合蛋白，其与结合CD86的解离率低于野生型CTLA4。

21. 权利要求1-20任一项的融合蛋白，其是可溶的。

22. 一种核酸分子，其包含编码对应于权利要求1-21任一项的融合蛋白的氨基酸序列的核苷酸序列。

23. 权利要求22的核酸分子，其包含如图8所示的始于-3核苷酸位的胍、止于+1071核苷酸位的腺嘌呤的核苷酸序列，或者包含如图8所示的始于+1核苷酸位的腺嘌呤、止于+1071核苷酸位的腺嘌呤的核苷酸序列。

24. 一种核酸分子，其包含权利要求23的核酸分子的一部分，其中所述部分编码所述融合蛋白的完整细胞外结构域。

25. 一种载体，其包含权利要求22-24任一项的核酸分子的序列。