[发明专利]一种筛选活性组分或物质的方法及依其制得的活性组分

说明书

技术领域

本发明涉及一种筛选、分离活性组分或物质的方法及依其所得的活性组分，特别涉及一种结合生物传感器技术和分离技术，从天然药物中筛选、分离具有结合PBP2a活性组分或活性物质的方法，以及采用该方法从天然药物中筛选、分离得到的能与PBP2a发生结合作用的活性组分。

背景技术

国内外研究经验表明，从来自于天然的先导化合物中很有希望得到治疗疑难病症的新药，从天然化合物筛选得到的有效单体的命中率比合成化合物高。临床及实验研究表明，某些天然药物制剂可通过各种机制发挥对症病中病原分子的治疗作用，但由于天然药物组成成分复杂，尤其是受方法学的限制，天然药物中具有抗病原分子作用的有效物质基础尚不清楚。

例如耐甲氧西林金葡菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus，以下简称MRSA)感染已成为全球性问题，其感染率逐年上升，不仅对β-内酰胺类抗生素均耐药，而且对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、利福平均产生不同程度的耐药，甚至出现了耐万古霉素金葡菌。

葡萄球菌是引起院内感染最重要的病原菌，根据有无凝固酶可将葡萄球菌分为凝固酶阳性菌(主要为金黄色葡萄球菌，staphylococcus aureus，SA)和凝固酶阴性菌(coagulase-negative staphylococcus，CNS)。金黄色葡萄球菌(金葡菌)是临床上最常见的毒性较强的致病菌之一。20世纪30年代末，磺胺药物首次用于治疗金葡菌感染性疾病，由于细菌耐药性的产生使其广泛应用受到限制。20世纪40年代初青霉素问世后，金葡菌引起的感染性疾病曾受到较好的控制，但随着青霉素的广泛使用，有些金葡菌产生青霉素酶水解β-内酰胺环，表现为对青霉素的耐药。因而人们又研究出一种新型的耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林，1959年应用于临床后曾有效的控制了金葡菌产酶株的感染，但1961年英国Jevons首次发现了MRSA。MRSA与其他葡萄球菌具有相同的毒力和致病力，在美国许多家医院，临床分离的金葡菌中MRSA所占的比例逐年攀升，从1975年占2.4％，到1991年占29％，2002年已达50％。尤其是当氟喹诺酮类药物应用于临床后，迅速出现的金葡菌耐药株中MRSA的比例急剧上升。

MRSA感染最大危害在于它是医院感染的重要病源，院内一旦发生流行，往往迅速传播，较难控制。随着时间的推移，这种耐药菌逐渐从医院扩散至社区中，1999年，美国发生首例由于社区获得性MRSA感染所致的死亡事件。目前，MRSA已成为院内外感染的重要致病菌之一。MRSA不再仅从医院内获得，社区获得性MRSA(community-acquired MRSA，C-MRSA)感染也同样常见。在美国社区获得性MRSA感染病例逐年增多，1980～1981年美国底特律市还出现了社区获得性MRSA感染的爆发，患者中2/3为静脉药物使用者，1995年有报道41％的MRSA感染来源于院外。1998～1999年我国9大城市MRSA社区获得感染患者的检出率亦达21.84％(19/87)。

2002年6月在美国出现了第一例万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌(vancomycin-resistant staphylo-coccus aureus，以下简称VRSA)的报道，同年9月再次报道一例，这两例VRSA均检出mecA基因与vanA基因，分别决定耐甲氧西林与耐万古霉素的特性。国内尚未见到万古霉素中介敏感的金黄色葡萄球菌(vancomycin-intermediate staphylococcus aureus， VISA)或VRSA的报道，但在我国细菌耐药监测中心调查中，观察到1994～2000年万古霉素对MRSA抑菌圈呈缩小趋势，提示其敏感性较前有所下降，随着选择压力的不断增大，VISA、VRSA的出现是不可避免的。有入认为，MRSA感染与乙肝、AIDS同为当今世界三大感染性疾病。

MRSA耐药特点为不均一耐药性和多重耐药：MRSA耐药性的表达分为同质性和异质性两种。同质性耐药菌株表现为所有细菌为单一性耐药的群体，而异质性耐药菌株则在同一群体中有2个或2个以上耐药程度不同的业群体，其中仅有极少部分菌株表现出高度耐药。MRSA除对甲氧西林耐药外，对其他所有与甲氧西林结构相似的β-内酰胺类抗生素均耐药，MRSA还可通过改变抗生素作用靶位，产生修饰酶，降低膜通透性，产生大量对氨基苯甲酸等不同机制，对氨基糖苷类、大环丙酯类、四环素类、氟喹诺酮类、磺胺类、利福平均产生不同程度的耐药。