[发明专利]利用研磨法从凝胶中纯化小片段DNA的方法和用途无效
| 申请号： | 200710071183.6 | 申请日： | 2007-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN101125874A | 公开（公告）日： | 2008-02-20 |
| 发明（设计）人： | 林旭瑷;陈寅;严杰 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07H21/04 | 分类号： | C07H21/04;C07H1/06 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 张法高 |
| 地址： | 310027*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 研磨 凝胶 纯化 片段 dna 方法 用途 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用研磨法从凝胶中纯化小片段DNA的方法，其特征在于包括如下步骤：
1)在回收包含PCR或酶切产生的小分子量DNA片段的高浓度凝胶中，加入400～800μl 0.1倍TE缓冲液或灭菌水，用匀浆器研磨破碎，10000～12000rpm离心5～10分钟，取上清；
2)在上清液中加入1/3体积pH为5.2的3M NaAc和2倍体积的无水乙醇，或者0.6倍体积的异丙醇，以沉淀DNA；10000～12000rpm离心5～10分钟，弃上清；
3)用600～1000μl 70％的冷乙醇洗涤DNA沉淀，10000～12000rpm离心3～5分钟，弃上清；
4)真空抽干DNA沉淀，让残留的乙醇挥发干净，将DNA沉淀溶解在0.1倍TE缓冲液或灭菌水中，-20℃保存。
2.根据权利要求1所述的采用研磨法快速高效回收小分子量DNA的方法，其特征在于所述的小分子量DNA片段小于100bp。
3.一种如权利要求1所述的方法纯化的小分子量DNA的用途，其特征在于用于克隆、转化、转染、DNA疫苗接种和/或PCR反应。
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