[发明专利]一种甘蔗脱毒组培快繁的方法

权利要求书

1.一种甘蔗脱毒组培快繁的方法，其特征在于按以下步骤进行：

1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

(1)基本培养基：用MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；

(2)愈伤组织诱导培养基：MS中添加2，4-D 1～2mg/L和NAA 0.1～0.2mg/L；

(3)分化培养基：MS中添加6-BA2.0～3.0mg/L和NAA 0.1～0.3mg/L；

(4)增殖培养基：MS中添加6-BA0.5～1.0mg/L和NAA0.1mg/L；

(5)生根培养基：1/2MS中添加NAA0.1～0.5mg/L；

2)外植体的选取与灭菌：取甘蔗的顶芽或腋芽，经灭菌处理，作为脱毒组培用的外植体；

3)愈伤组织诱导培养：将步骤2)灭菌处理后的顶芽或腋芽在无菌条件下，摘取其2～3mm的茎尖组织，接种在愈伤组织诱导培养基上，诱导形成愈伤组织；

4)分化培养：将步骤3)诱导形成的愈伤组织移植至分化培养基分化出丛芽；

5)增殖培养：将步骤4)分化的丛芽切成单株接种在增殖培养基上，再分化出丛芽；

6)生根培养：将步骤5)增殖形成的丛芽切成单株接种在生根培养基中进行生根培养；

7)移栽：当步骤6)的生根组培苗生长至3～5cm，根数5根以上时，移栽基质培养至成苗。

2.根据权利要求1所述的甘蔗脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述的培养基，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：

(1)基本培养基：用MS基本培养基，白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8；

(2)愈伤组织诱导培养基：MS+2，4-D 1.5mg/L+NAA 0.15mg/L；

(3)分化培养基：MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.15mg/L；

(4)增殖培养基：MS+6-BA 0.75mg/L+NAA 0.1mg/L；

(5)生根培养基：1/2MS+NAA 0.25mg/L。

3.根据权利要求1所述的甘蔗脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述的灭菌处理是将外植体先经75％酒精浸泡0.5～1.0min，再用0.1％升汞溶液灭菌10～15min，最后用无菌水冲洗3～5次。

4.根据权利要求1所述的甘蔗脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述的移栽基质由泥炭∶珍珠岩∶蛭石按体积比3∶1∶2配制而成。