[发明专利]悬浮培养原生植株药用有效成份的铁皮石斛胚状体工艺无效
申请号: | 200710064005.0 | 申请日: | 2007-02-16 |
公开(公告)号: | CN101245334A | 公开(公告)日: | 2008-08-20 |
发明(设计)人: | 曹兴华 | 申请(专利权)人: | 曹兴华;马兴凯 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A61K36/8984;A23L1/29;A23L2/00;C12P19/04 |
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地址: | 100085北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 悬浮 培养 原生 植株 药用 有效 成份 铁皮 石斛 胚状体 工艺 | ||
1. 一种经体外悬浮培养获得的铁皮石斛胚芽,其培养过程是:
铁皮石斛带休眠芽茎段,经常规灭菌后,在超净台上切取带节的切段,插入到1/2MS.矿物盐类成份2.5%蔗糖和0.5%麦芽糖为炭源、5%香蕉汁、4.5克/升琼脂粉、PH5.8、NAA、BA适量的固体培养基上。29℃±1,自然室内光照条件,经45~50天后,在休眠芽上生长出浅绿色的起始胚状体。等到起始胚状体“球”长到黄豆粒大小时,小心地、及时地将胚状体球剥离外植体,放在相同的上述培养基上扩增。达到足够数量后,转入到上述培养基去掉琼脂粉的液体培养基中,进行悬浮培养,每个150毫升三角瓶装液75毫升,每瓶按5%(W/W)接种率接种;每7天继代一次;经3-4次继代后;进入筛选程序,从培养物中不断挑选出那些生长紧密、呈圆球状、浅绿色、增殖速度快的胚状体“球”,淘汰那些长成丛芽状或芽簇状的培养物。通过3~4个月的连续筛选,最终达到每10天收获一次,其“固液比”达到25~35%,多糖含量达到16%以上;“比生物生长速率”达到8.4~9.2毫克/克·天;并能保持周年稳定的成熟系。
2. 权力要求1中所述铁皮石斛胚芽的培养体系,其“固液比”为25~35%,“比生物生长速率”达到8.4~9.2毫克/克·天。
3. 权力要求1中所述铁皮石斛胚芽,其多糖含量达为16%以上。
4. 权力要求1中所述铁皮石斛胚芽,其DNA图谱与野生铁皮石斛相同。
5. 用权力要求1中所述铁皮石斛胚芽制备的干品,用于中草药的配伍。
6. 用权力要求1中所述铁皮石斛胚芽制备的干粉,用于食品添加剂。
7. 用权力要求1中所述铁皮石斛胚芽制备的干粉,用于饮料的制备。
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