[发明专利]一种治疗习惯性流产的生物学制剂有效
| 申请号: | 200710062487.6 | 申请日: | 2007-07-31 |
| 公开(公告)号: | CN101129405A | 公开(公告)日: | 2008-02-27 |
| 发明(设计)人: | 崔瀓;杨彦忠 | 申请(专利权)人: | 崔澂 |
| 主分类号: | A61K35/14 | 分类号: | A61K35/14;A61P15/06;C12N5/08 |
| 代理公司: | 石家庄冀科专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 李羡民;郭绍华 |
| 地址: | 050081河北省石家庄市中*** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 治疗 习惯性流产 生物学 制剂 | ||
1.一种治疗习惯性流产的生物学制剂,其特征在于,它以男性外周血为原材料,并按下述步骤进行:
a.培养男性外周血T细胞:
抽取健康成年男性外周血50mi;玻璃球脱纤维Hanks液1.5倍稀释,分离淋巴细胞,收集单个核细胞;Hanks液清洗,用RPMI-1640完全培养液重悬、计数,并调整细胞浓度至2×106/ml,加入植物血凝素(PHA),使终浓度为100μg/ml;37℃培养72h;收集培养液的上清,4℃保存备用;
b.制备T细胞exosomes:
取上述外周血T细胞培养上清,以1500g离心10min去除细胞及细胞碎片;分子量100 000超滤管过滤浓缩5倍后;以30mg/ml蔗糖/D2O为密度垫,以100 000g超速低温离心75min,收集底部的缓冲垫;PBS稀释,100 000g超速低温离心75min,获得exosomes;0.22μm无菌滤膜过滤分装,-80℃保存备用。
2.根据权利要求1所述的治疗习惯性流产的生物学制剂,其特征在于,所述体外培养应换用新鲜含PHA的培养液、反复刺激、培养,至镜下观察转化率大于75%。
3.一种治疗习惯性流产的生物学制剂的用途,其特征在于,将其用于制备治疗习惯性流产、自身免疫性生疾病的药剂或器官移植后免疫耐受的诱导剂。
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