[发明专利]栽培小麦Brock中一个受白粉菌诱导应答的基因cDNA序列及其获得方法无效

专利信息
申请号: 200710058140.4 申请日: 2007-07-16
公开(公告)号: CN101126091A 公开(公告)日: 2008-02-20
发明(设计)人: 王振英;李刚;彭永康 申请(专利权)人: 天津师范大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C07K14/415
代理公司: 天津市杰盈专利代理有限公司 代理人: 朱红星
地址: 300387天*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 栽培 小麦 brock 一个 白粉 诱导 应答 基因 cdna 序列 及其 获得 方法
【权利要求书】:

1.栽培小麦Brock中一个受白粉菌诱导应答的基因cDNA序列,其特征在于它与小麦TCTP基因有98%的同源性,cDNA全长766bp;有一个长36bp的5’UTR和长223bp的3’UTR以及长507bp的开放阅读框;编码一个168aa的多肽链,cDNA序列为:

TCCTTTTTCGGGGGAGAAATCTCAAGAGGCGGCACCTCGCACTGTATGCTAAAATCTATGCTGTCTTCAGTATTTTTGCTCTTATCTATGGTTGTCAGTCGACTCTCCAATGTTGGTGTCAGTAACTGTCAGATGTTGAGTGTCTTGAAAACTTTCTGATAATTGTGGGATTTGCTTTGTAATGGTAATCGTGAAATTGGTGTGGTTGTGTTTTGGTTGAATCAAGAGATTCTGCCCTGTTAAAAAAAAAAAAAAAAAA

其中上述序列的阴影部分为编码序列,ATG示起始密码子,TAA示终止密码子。

2.如权利要求1所述的栽培小麦Brock中一个受白粉菌诱导应答的基因cDNA序列,其特征在于,该基因的编码区长507bp,编码168aa多肽链的氨基酸序列为:MLVYQDKLSGDELLSDSFPYRELENGVLWEVDGHWVVQGAVDVDIGANPSAEG                                             TCTP1GGDDEGVDDQAVKVVDIVDTFRLQEQPAFDKKQFISHMKRYIKNLSAKLEGDDLDAFKKNVESATKYLLSKLKDLQFFVGESMHDDGGVVFAYYKEGAADPTFLYFAHGLKEVKC                      TCTP2

其中TCTP1、TCTP2为多肽链氨基酸序列的两个结构特征区。

3.如权利要求1或2所述的栽培小麦Brock中一个受白粉菌诱导应答的基因cDNA序列,其特征在于,它是用同源克隆技术采用下述方法得到的:以抗白粉病普通小麦Brock为材料,提取白粉菌胁迫5天的总体RNA,根据小麦NBS类抗病基因保守序列设计的简并引物,经RT-PCR扩增,获得比预期大、与TCTP基因cDNA有97%同源性的653bp cDNA片段,通过RACE技术,获得全长为766bp的完整TCTP基因,与已发表的小麦TCTP基因有98%的同源性,该基因包括一个507bp的开放阅读框,36bp的5’非翻译区,223bp的3’非翻译区;编码一个168aa的多肽链,与已发表的小麦TCTP基因编码的氨基酸序列有99%的同源性;ScanProsite分析表明,该多肽链具有TCTP1和TCTP2两个特征结构区和7个可能的功能位点;表达半定量PCR分析表明,Brock中的TCTP基因受白粉菌诱导,并随染菌时间增长,表达量增加。

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