[发明专利]泰乐菌素和替米考星残留检测用单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒

权利要求书

1.一种能同时识别泰乐菌素和替米考星的单克隆抗体，其特征在于，它是由保藏号为CCTCC NO：C200719的杂交瘤细胞株P3C4所分泌的。

2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株P3C4，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为 CCTCC NO：C200719。

3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，它是由半抗原去碳霉糖泰乐菌素与对 肼基苯甲酸或己二酰二肼或O-羧甲基羟胺再与牛血清白蛋白偶联的偶联物作为免疫原制备得 到的。

4.包含权利要求1所述的单克隆抗体的试剂盒。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，该试剂盒是同时检测泰乐菌素和替米考星的酶联免疫试 剂盒。

6.一种同时检测泰乐菌素和替米考星残留的酶联免疫方法，包括免疫原、包被原和抗体的 制备以及样品的前处理，其步骤如下：

(1)将半抗原去碳霉糖泰乐菌素与对肼基苯甲酸或己二酰二肼或O-羧甲基羟胺再与牛血清白 蛋白偶联得到免疫原；

(2)将半抗原去碳霉糖泰乐菌素与对肼基苯甲酸或己二酰二肼或O-羧甲基羟胺再与卵清蛋白 偶联得到包被原；

(3)用步骤(1)的免疫原制备得到保藏号为CCTCC NO：C200719细胞株P3C4所分泌的单 克隆抗体；

(4)用步骤(2)的包被原包被固相载体；

(5)将待测样品用体积百分比为20-30％乙腈溶液提取、乙酸乙酯萃取、氮气吹干和样品稀释 液重新溶解得到待测物；

(6)对步骤(5)的待测物进行检测；

其中：

样品稀释液的组分及配比为：NaCl 8.0g，KH₂PO₄ 0.2g，Na₂HPO₄·12H₂O 2.9g，KCl 0.2g， 硫柳汞0.01g，加双蒸水至1000mL。

7.权利要求1所述的单克隆抗体在制备同时检测泰乐菌素和替米考星的酶联免疫试剂盒中 的应用。

8.权利要求4或5所述的试剂盒在泰乐菌素和替米考星残留检测中的应用。