[发明专利]一种食品中烟酸含量的分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种物质的定量分析方法，尤其涉及一种食品中烟酸含量的分析方法。

背景技术

烟酸也称作维生素B₃，它是人体必需的13种维生素之一。在水中略溶，在碳酸氢钠和氢氧化钠溶液中易溶。食品中烟酸的含量测定是必要的指标之一，常规化学检验方法复杂，费时费力，近年来发展的高效液相色谱方法虽然提高了烟酸的分析速度，但因为烟酸的极性大，传统高效液相色谱方法中往往需要添加离子对试剂来进行分离，在增加分析成本的同时，也增加了分析时间。

发明内容

本发明的目的就是为了解决上述现有技术存在的问题，提供一种新的食品中烟酸含量的分析方法。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种食品中烟酸含量的分析方法，采用加压毛细管电色谱仪分析，包括以下步骤：

a、制备烟酸标准溶液

精确称量烟酸10mg置于100ml的容量瓶中，用浓度为5mmol的磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释至刻度，作为烟酸标准溶液；

b、制备样品溶液

将待分析的食品样品以合适的方式溶解，所得溶液以0.22μm微孔滤膜过滤，收集过滤液作为样品溶液；

c、进样分析

将制备好的烟酸标准溶液和样品溶液分别直接向加压毛细管电色谱仪进样分析，得到烟酸标准色谱图和样品色谱图；

d、对比所得烟酸标准色谱图和样品色谱图，标注样品中烟酸的色谱峰，计算样品中烟酸色谱峰的积分面积，用归一法计算出烟酸在该样品中的百分含量。

步骤c中所述的进样分析的分析条件为：

毛细管色谱柱：采用粒径5μm的C18装填的石英毛细管柱，内径150μm，柱长55cm，有效柱长25cm；

流动相：由85体积份的5mmol磷酸盐溶液和15体积份的乙腈配制而成；

检测波长：254nm；

流速：0.05ml/min；

电压：+10kY。

加压毛细管电色谱(pCEC)技术是液相色谱和毛细管电泳技术的巧妙结合。它是将色谱填料填充到毛细管中，或在毛细管内表面键合、涂敷固定相，以电渗流作为流动相的推动力，根据样品中各组分在固定相和流动相间分配系数的差异和在电场中迁移速率的不同而实现分离的一种高效微柱分离技术，具有液相色谱和电泳的双重优势。它一方面解决了CE选择性差、难以分离中性物质的问题，另一方面大大提高了液相色谱的分离效率。与现有技术的分析方法比较，采用加压毛细管电色谱法分析食品中烟酸的含量，不仅流动相相对简单，样品用量少，峰容量大，而且分析过程稳定，方法精密度好，并具有很好的分离效果。

附图说明

图1是采用本发明的分析方法得到的烟酸标准色谱图；

图2是采用本发明的分析方法分析奶粉中烟酸的百分含量得到的色谱图。

具体实施方式

1、烟酸标准溶液的制备

精确称量烟酸10mg置于100ml的容量瓶中，用浓度为5mmol的磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释至刻度，作为烟酸标准溶液(浓度为1.0×10^-4g/ml)。

2、样品溶液的制备

精确称量奶粉(飞鹤牌)1g于一小烧杯中，用热水溶解，摇匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，转移至100ml的容量瓶中，用5mmol的磷酸盐缓冲溶液(pH＝7.0)溶解并稀释至刻度，作为样品溶液。

3、烟酸标准色谱图的制作

将制备好的烟酸标准溶液直接向加压毛细管电色谱仪进样分析，进样量为700nl，分析时间为20min；分析条件为：毛细管色谱柱采用粒径5μm的C18装填的石英毛细管柱，内径150μm，柱长55cm，有效柱长25cm；采用由85体积份的5mmol磷酸盐溶液和15体积份的乙腈配制而成的流动相进行等度分析；检测波长：254nm；流速：0.05ml/min；电压：+10kV。得到烟酸标准色谱图如图1所示，其中时间9.746’处的峰为烟酸(浓度为1.0×10^-4g/ml)的色谱峰。

4、奶粉中烟酸含量的分析

将制备好的样品溶液直接向加压毛细管电色谱仪进样分析，进样量为700nl，分析时间为20min；分析条件为：毛细管色谱柱采用粒径5μm的C18装填的石英毛细管柱，内径150μm，柱长55cm，有效柱长25c m；采用由85体积份的5mmol磷酸盐溶液和15体积份的乙腈配制而成的流动相进行等度分析；检测波长：254nm；流速：0.05ml/min；电压：+10kV。得到色谱峰图如图2所示，其中时间9.820’处的峰为烟酸的色谱峰。

5、样品中烟酸的百分含量的计算