[发明专利]利用差速消化实现细胞高度富集的方法无效
| 申请号： | 200710039323.1 | 申请日： | 2007-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN101285050A | 公开（公告）日： | 2008-10-15 |
| 发明（设计）人： | 刘伟;金羽青;洪坦辉;曹谊林 | 申请（专利权）人： | 上海国睿生命科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 201109*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 消化 实现 细胞 高度 富集 方法 | ||
1. 一种富集细胞的方法，其特征在于，它包括步骤：
(a)将贴壁培养的细胞群与蛋白酶混合，从而使待分离的细胞从贴壁细胞群上脱落下来，成为游离的待分离细胞，其中所述的贴壁培养的细胞群含有待分离的细胞以及待弃的细胞；所述的待分离的细胞和待弃的细胞是不同的细胞；
(b)将游离的待分离细胞与所述的细胞群分开，从而获得待分离的细胞。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的待分离的细胞和待弃的细胞具有不同的脱壁时间，所述的脱壁时间相差5min-36小时。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的细胞群含有雪旺细胞和成纤维细胞。
4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的细胞群含有内皮细胞和成纤维细胞。
5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)后还包括步骤：
(c)用待分离细胞或待弃细胞重复步骤(a)、(b)，得到富集的待分离细胞或待弃细胞。
6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于，重复步骤(a)、(b)1-5次。
7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，它包括步骤：
(a)将贴壁培养的雪旺细胞和成纤维细胞形成的细胞群与蛋白酶混合，从而使雪旺细胞从贴壁细胞群上脱落下来，成为游离的细胞；
(b)将游离的SC与仍然保持贴壁的细胞群分开，从而获得纯度较高的雪旺细胞。
8. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，它包括步骤：
(a)将贴壁培养的内皮细胞和成纤维细胞形成的细胞群与蛋白酶混合，从而使内皮细胞从贴壁细胞群上脱落下来，成为游离的细胞；
(b)将游离的内皮细胞与仍然保持贴壁的细胞群分开，从而获得内皮细胞。
9. 如权利要求1-8任一所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶包括胶原酶，胰酶，中性蛋白酶，胃蛋白酶，糜蛋白酶，组织蛋白酶，木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。
10. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法还包括步骤：
(d)将获得的待分离细胞用作组织工程的种子细胞；或用于制备移植物。
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