[发明专利]一种检测少儿肥胖遗传易感风险的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种检测少儿肥胖遗传易感风险的试剂盒，通过同时检测载脂蛋白E基因(APOE)、脂蛋白脂酶基因(LPL)、瘦素(LEP)编码基因和过氧化物酶体增生激活受体γ基因(PPARγ)上的单核苷酸多态性位点基因型来评估少儿肥胖遗传易感风险。

背景技术

肥胖症是一种热量代谢障碍，摄入热量超过消耗的热量，引起体内脂肪积聚过多所致。一般认为超过按身高(长)所测标准体重20％即为肥胖。目前，我国小儿肥胖症发病率有逐年上升趋势，已从5％以下提高到10％以上，单纯肥胖症发病率达5％-8％。少儿肥胖与许多成年期慢性病如高血压、高血脂、糖尿病、动脉粥样硬化性心脑血管疾病有非常密切关系，肥胖导致这些疾病的患病率和死亡率急剧上升，使人群健康水平下降。因此，正确认识少儿肥胖症，从少儿期着手预防和治疗肥胖症十分重要。

少儿肥胖病因主要有：摄入热量过多；运动过少热量消耗少；遗传影响；神经中枢调节；内分泌代谢失调；心理因素。近年来对肥胖症的遗传基因研究甚多，人类肥胖属于多基因遗传，遗传在肥胖发病中起一个易发作用，与其他发病因素相互作用。已知，编码载脂蛋白E(APOE)、脂蛋白脂酶(LPL)、瘦素(LEP)和过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARγ)的四种基因与少儿肥胖有密切关系。

APOE是一个主要的乳糜微粒的辅基蛋白，可以与肝脏细胞或者周围细胞上的受体结合，对于甘油三酯蛋白的正常分解代谢是非常重要的。APOE蛋白最常见的三种亚型为APOE2，-E3和-E4，分别由三种单倍型ε2、ε3、ε4构成。这三种亚型在氨基酸编码序列上的差异主要在两个位点，位点A为第130号氨基酸残基，位点B为第176号氨基酸残基。其中E3亚型是最为常见的亚型，被定义为APOE基因的野生型。Cys130Arg对应的SNP为rs429358，碱基变化为T471C；Cys176Arg对应的SNP为rs7412，碱基变化为T609C。Sanghera DK等通过对一组9-10岁女童样本的研究发现，APOE遗传多态性对血脂水平及肥胖程度和血脂水平的关系有明显影响。向伟等采用改良的聚合酶链式反应2限制性片段长度多态性方法分析肥胖及健康少儿APOE基因型，也发现单纯型肥胖少儿有APOE基因多态性的变化。张晓等检测了324名8~12岁单纯肥胖少儿的血脂，测量体重和身高，计算BMI，同时使用多聚酶链反应检测他们的APOE基因型，发现APOE基因多态性可能对单纯肥胖少儿BMI与血脂的关系有一定影响。

LPL基因编码脂蛋白脂酶，该酶在心脏、肌肉和脂肪组织中进行表达，以同型二聚体蛋白的形式行使功能，其分子生物学的作用包括两部分，一部分为甘油三脂的水解酶作用，另一部分则是受体介导的脂蛋白内吞作用的桥梁。LPL蛋白上的位点突变不仅与脂蛋白代谢、血脂水平密切相关，而且还与个体的肥胖易感性有关。脂蛋白脂酶LPL在体内主要参与脂质代谢通路，作为催化酶催化极低密度脂蛋白或者低密度脂蛋白的水解。rs320位点是位于LPL基因第8号内含子的多态，由T到G的改变使原有的HindIII酶切位点消失。Jemaa等对236例法国巴黎肥胖患者(162例女性和74例男性，实测体重＞120％理想体重)LPL基因多态性的分析显示，HindIII多态性与BMI相关(P＜0.05)，而且此基因的变异使个体肥胖易感性增加。李蓉等在2003年通过研究发现，肥胖组H+H+基因型者腰围、VA等反映中心性肥胖的测量指标显著高于非H+H+基因型者，说明LPL基因Hind III多态性与肥胖人群脂肪的向心性聚积有关系。