[发明专利]一种检测女性骨质疏松症易感遗传风险的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域，更具体的，本发明涉及一种检测女性骨质疏松症易感遗传风险的试剂盒，通过同时检测与女性骨质疏松症易感遗传风险密切相关的白细胞介素6基因(IL-6)、骨保护素基因TNFRSF11B(OPG)、肿瘤坏死因子-α基因(TNF-α)、维生素D受体基因(VDR)的单核苷酸多态性位点基因型来评估女性骨质疏松症易感遗传风险。

背景技术

骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征，导致骨质脆性增加和易于骨折的代谢性疾病。OP可分为原发性和继发性两类。继发性者的原发病因明确，常由内分泌代谢疾病(如性腺功能减退症、甲亢、甲旁亢、Cushing综合症、1型糖尿病等)或全身性疾病(如器官移植术后、肠吸收不良综合症、神经性厌食、肌营养不良症、慢性肾衰竭、骨髓纤维化、白血病、系统性红斑狼疮、营养不良症等)引起。原发性者又可分为两种亚型，即I型和II型。I型即绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis，PMOP)发生于绝经后妇女，其中多数患者的骨转换(turnover)率增高，亦称高转换型OP；II型(老年性)OP多见于60岁以上的老人，女性的发病率为男性的2倍以上。

已知，编码白细胞介素6(IL-6)、骨保护素TNFRSF11B(OPG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、维生素D受体(VDR)四种基因与女性骨骼健康有密切关系。

基因编码的白细胞介素6(IL-6)是一种多功能细胞因子，参与多种细胞的生长、分化和功能调节，在免疫和炎症反应中具有重要作用，是机体重要的免疫-神经-内分泌调节因子。其功能的多样性与许多细胞表面有IL-6受体的表达，IL-6受体和信号传导部分GP130将多种生物信号传给不同的组织和细胞有关。IL-6可由T细胞、B细胞、单核细胞和非淋巴细胞产生，其基因表达的变化与某些疾病的生理和病理变化密切相关。近来研究发现IL-6参与骨代谢，IL-6的主要作用是诱导破骨细胞产生和破骨细胞活化，IL-6和IL-1可以直接加强破骨细胞的活性、抑制其凋亡、并延长破骨细胞的寿命；另外，IL-6还通过细胞核因子-κB(NF-κB)受体活化因子(RANK)的配基(RANKL)依赖机制加强破骨细胞的能力，这主要是经由骨保护素(OPG)/RANKL/RANK系统实现的。两方面协同作用促使破骨活动加强，骨丢失增加。有人认为IL-6对成骨细胞有一定的增殖分化作用。IL-6的表达状况受基因调控，特别是IL-6的基因调控区与IL-6的表达具有更直接的关系；其血清水平的变化与一些疾病的病理生理过程密切相关。随着人们对分子病理学和疾病相关基因研究的不断深入，一些学者发现IL-6可能参与了脑血管疾病的病理生理过程。目前国外研究表明IL-6的基因调控区-174G/C的多态性(rs1800795)可改变IL-6的转录，G等位基因导致血清与组织中IL-6高水平表达，与骨质疏松、动脉粥样硬化、冠心病等疾病密切相关。

肿瘤坏死因子受体超家族，成员11b(TNFRSF11B)，即骨保护素(osteoprotegerin OPG)是肿瘤坏死因子受体(tumor necrotic factor receptor TNFR)超家族成员之一。OPG是一种分泌型糖蛋白，以单体形式在胞内合成，以双体形式分泌到胞外。OPG缺少跨膜和胞浆区域，但包含7个主要结构域。研究发现OPG不仅涉及骨重塑、免疫调节、血管的发生等过程，而且是影响破骨细胞分化、生成及活性的最终途径，在骨质疏松的发生机制中扮演着重要的角色。OPG基因存在多个核苷酸多态性，国内外研究已证明，rs2073618位点是位于OPG基因第一外显子上的C/G变异。OPG基因外显子1编码的是OPG信号肽部分，是OPG从细胞中分泌所必需的。这一多态性使该外显子的第三个氨基酸由赖氨酸Lys(AAG)变成了天冬酰氨Asn(AAC)，赖氨酸是一种必需氨基酸而天冬氨酰是一种极性氨基酸。这种在基因信号肽区域的点多态性可能会影响OPG的分泌动力学或OPG mRNA的表达其中GG基因型将增加妇女骨质疏松的发病风险。