[发明专利]一种从生物组织样品中分离RNA的试剂及其从生物组织样品中分离提取RNA的方法无效
| 申请号: | 200710035694.2 | 申请日: | 2007-09-07 |
| 公开(公告)号: | CN101381764A | 公开(公告)日: | 2009-03-11 |
| 发明(设计)人: | 易银沙 | 申请(专利权)人: | 长沙赢润生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C07H21/04;C07H1/08 |
| 代理公司: | 长沙正奇专利事务所有限责任公司 | 代理人: | 卢 宏 |
| 地址: | 410013湖南省长*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 生物 组织 样品 分离 rna 试剂 及其 提取 方法 | ||
1、一种从生物组织样品中分离RNA的试剂,包括RNA抑制剂,去垢剂,pH调节剂, 其特征在于还加入了聚乙烯吡咯烷酮,其浓度为1—3%(m/V);上述溶液中再 加入等体积的酸性水饱和苯酚和1/5体积的2M乙酸钠混匀;pH为3.2—3.8。
2、根据权利要求1所述的分离RNA的试剂,其特征在于RNA抑制剂为异硫氰酸胍, 加入苯酚和乙酸钠之前的浓度为4M。
3、根据权利要求1所述的分离RNA的试剂,其特征在于加入苯酚和乙酸钠之前的 去垢剂十二烷基肌酸钠和十二烷基硫酸钠浓度分别为2%(m/V)和0.1%(m/V)。
4、根据权利要求1至3之一所述的分离RNA的试剂,其特征在于加入苯酚和乙酸 钠之前的聚乙烯吡咯烷酮浓度为2%。
5、根据权利要求1至3之一所述的分离RNA的试剂,其特征在于pH调节剂为柠 檬酸三钠、乙酸钠、冰醋酸,其浓度分别为0.75M、2M,适量冰醋酸。
6、一种用权利要求1至5之一所述的从生物组织样品中分离RNA试剂的提取RNA 的方法,包括如下步骤:
(1)用分离RNA试剂预处理动物或植物组织;
(2)加入萃取剂萃取;
(3)水相分离后再萃取;
(4)分离后得到RNA沉淀;
(5)清洗后备用;
其特征在于在上述第(1)步中,按每50ml变性液加入14.4mol/L的β-巯基 乙醇0.36ml的剂量加入;第(3)步中采用异丙醇和高盐的混合液萃取的。
7、根据权利要求6所述的提取RNA的方法,其特征在于所述的高盐为0.8M柠檬 酸钠和1.2MNaCl。
8、根据权利要求7所述的提取RNA的方法,其特征在于所述异丙醇和高盐为等比 例混合的。
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