[发明专利]一种高效表达病毒基因dsRNA的载体及其应用无效
申请号: | 200710034931.3 | 申请日: | 2007-05-16 |
公开(公告)号: | CN101067137A | 公开(公告)日: | 2007-11-07 |
发明(设计)人: | 张德咏;刘勇;朱春晖;罗源华;成飞雪 | 申请(专利权)人: | 湖南省植物保护研究所 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/33;C12N1/21 |
代理公司: | 湖南兆弘专利事务所 | 代理人: | 陈晖 |
地址: | 410125*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高效 表达 病毒 基因 dsrna 载体 及其 应用 | ||
1、一种高效表达病毒基因dsRNA的载体,其特征在于该载体以PBV220为出发质粒,构建了含有两个方向相反的热激启动子PRPL的载体PBV222,该载体的碱基序列如SEQ ID No.1所示。
2、一种如权利要求1所述的高效表达病毒基因dsRNA的载体的应用,其特征在于该载体用于病毒基因dsRNA在大肠杆菌中的热诱导表达方法为:
(1)将拟表达dsRNA的病毒基因克隆并与PBV222载体连接,构建可表达dsRNA的热激原核表达载体;
(2)将该原核表达载体转化RNase III缺陷的大肠杆菌特异菌株,30℃培养2h后立即升高温度至42℃,进行热诱导表达,继续培养4h。
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