[发明专利]一种检测WT1和MDR1基因异常表达的多重定量PCR试剂盒无效
| 申请号： | 200710031404.7 | 申请日： | 2007-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN101182570A | 公开（公告）日： | 2008-05-21 |
| 发明（设计）人： | 徐兵;宋小燕 | 申请（专利权）人： | 南方医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州市天河庐阳专利事务所 | 代理人： | 胡济元 |
| 地址： | 510515广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 wt1 mdr1 基因 异常 表达 多重 定量 pcr 试剂盒 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测WT1和MDR1基因异常表达的多重定量PCR试剂盒，该试剂盒由定量PCR缓冲液，DNA聚合酶，标准品，检测WT1基因的引物和探针，检测MDR1基因的引物和探针组成，其特征在于：
(1)标准品是重组pMD18载体，其中的外源基因是WT1基因和MDR1基因；
(2)检测WT1基因的引物和探针的核苷酸序列是：
WT1-F：5-CCCAGGCTGCAATAAGAGATATTT-3，
WT1-R：5-GTGTGCTTCCTGCTGTGCAT-3，
WT1-探针：5-AAGCTGTCCCACTTA-3；
(3)检测MDR1基因的引物和探针的核苷酸序列是：
MDR1-F：5-CAAGATCCTCCTGCTGGATGA-3，
MDR1-R：5-GAACCACTGCTTCGCTTTCTG-3，
MDR1-探针：5-ACGTCAGCCTTGGAC-3。
2.一种使用权利要求1所述的试剂盒检测WT1和MDR1基因异常表达的方法，其特征在于将WT1基因和MDR1基因在同一反应管中反应，反应的程序是93℃热启动3min，再按以下的过程循环40次：93℃变性45s，然后降温至55℃退火45s。
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