[发明专利]重组PAC1受体结抗剂D(25－44)RMMAX及其表达方法与应用

权利要求书

1.重组PAC1受体拮抗剂D(25-44)RMMAX，其氨基酸序列如SEQID NO：2所示。

2.编码权利要求1所示重组PAC1受体拮抗剂D(25-44)RMMAX的核苷酸序列，如SEQ ID NO：1所示。

3.一种权利要求1所述重组PAC1受体特异拮抗剂D(25-44)RMMAX的表达方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)设计并合成D(25-44)RMMAX的基因：

(2)将D(25-44)RMMAX基因克隆到质粒pKYB的NdeI和XhoI位点间，构建重组质粒pKY-D(25-44)RMMAX；

(3)重组质粒转化表达宿主菌E.coli Strain ER2566，构建表达工程菌；

(4)用诱导剂IPTG诱导由目的多肽、蛋白内含肽和几丁质结合域组成的“三元”融合蛋白的表达；

(5)融合蛋白经几丁质柱纯化，硫醇诱导蛋白内含肽的N端切割，释放目的多肽C端硫酯，多肽C端硫酯水解得到重组多肽D(25-44)RMMAX。

4.如权利要求3所述的表达方法，其特征在于步骤(1)所述的D(25-44)RMMAX基因序列如SEQ ID NO：1所示。

5.权利要求1所述重组PAC1受体特异拮抗剂D(25-44)RMMAX在制备协助机体降糖或PAC1受体相关疾病药物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述重组PAC1受体特异拮抗剂D(25-44)RMMAX在制备治疗肥胖、高血糖或高血脂药物中的应用。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述PAC1受体相关疾病为脑损伤、脑缺血、防止神经细胞死亡、抗炎、角膜敏感性恢复、眼部神经损伤修复、男性阳痿、性冷淡、不孕不育、神经痛、神经病、神经混乱、焦虑症、记忆损伤、痴呆、认知混乱、中枢神经系统疾病、偏头痛、神经畏缩、心肌缺血、心肌梗死/纤维化、与生物钟睡眠及痛觉相关的疾病、动脉硬化、糖尿病、胃肠功能紊乱、肌萎缩症、胃溃疡、高血压、内毒性休克、血栓症、视网膜病变、心血管疾病、肾衰竭、心衰竭或脱发。