[发明专利]糖基化葛根素衍生物及其组合物在制备防治心脑血管病应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种新的葛根素衍生物及其药物组合物在制备治疗用于 心脑血管病；防治动脉粥样硬化、降低血脂、糖尿病肾病及对胰岛素抵抗、抗骨质疏松的应 用。

背景技术

葛根素(Puerarin)是从葛根(Radix Puerariae)中提取得到的有效成分，为常用天然药物， 收载于国家药品标准中，主要用于冠心病、心绞痛、心肌梗死、缺血性脑血管病、视网膜动 静脉栓塞、突发性耳聋等。葛根素制剂有注射液、冻干粉针剂、滴眼剂。实际使用主要是以 注射给药应用于临床，随着临床使用时间的延长，一些不良反应显露出来，这主要因为存在 如下缺点：1)体内消除速率快，临床使用剂量较大，口服生物利用度小；2)因为葛根素水 溶解度低，制剂大多含助溶剂以增加制剂的稳定，同时不溶性杂质也增加，对人体产生一定 的不良反应，致使用药安全性降低。因为本发明的产物与葛根素比具有溶解度好、药理活性 较高、体内半衰期延长，弥补了葛根素产品缺陷，使用药的安全性提高，疗效增加，是一发 展前景看好的新药产品。

发明内容

本发明的目的是提供一类新的葛根素的衍生物及其药学上可接受的盐，不仅使其水溶性 增加，而且克服体内消除速率快，及制剂稳定性不好的缺点。

本发明的另一目的是提供一种制备上述一类新的葛根素的衍生物及其药学上可接受的盐 的方法，葛根素的衍生物及其药学上可接受的盐水溶性好，可与药学上可接受的载体形成药 物组合物。

本发明的第三个目的是提供上述物质在制备治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死、缺血性脑 血管病；用于防治动脉粥样硬化、降低血脂、糖尿病肾病及对胰岛素抵抗、抗骨质疏松的药 物组合物应用，采用这种物质制备口服制剂片剂与胶囊，其体外溶出度增加，提示生物利用 度提高，更值得一提的是可做成稳定的以水为载体的制剂。

为完成上述三个发明任务，本申请的技术方案分别如下：

本发明的目的是提供一类新的葛根素的衍生物，其特征如结构式(I)所示：

式(I)

式(I)中，R为单糖基或寡糖基，其特征是单糖基为环状6碳糖或5碳糖基，6碳糖基如葡萄糖 基，甘露糖基，葡萄糖醛酸基，半乳糖基，半乳糖醛酸基，阿洛糖基，果糖基，山梨糖基， 金缕梅糖基，链霉糖基，2-氨基葡萄糖基，2-氨基半乳糖基，或5碳糖基，如阿拉伯糖基，来 苏糖基，木糖基，核糖基，夫糖基，鼠李糖基，鸡纳糖基，芹糖基，优选葡萄糖基；其寡糖 基为2-5个6碳糖或/和5碳糖脱水缩合而成寡糖基，如海藻糖基，槐糖基，新陈皮糖基，芸香糖 基，刺槐二糖基，麦芽糖基，蔗糖基，乳糖基，龙胆3糖基，果胶基，优选麦芽糖基。根据式 (I)化合物当R优选葡萄糖基时，生物转化的化合物为葛根素-7-O-葡萄糖苷，即葡萄糖基上 的半缩醛羟基与葛根素A环上7位碳上的羟基形成糖苷；当R优选麦芽糖基时，生物转化的化 合物是葛根素-7-O-异麦芽糖苷，即基团异麦芽糖基末端的第2个葡萄糖基上的半缩醛羟基与 葛根素A环上7-O-葡萄糖苷上的6位羟基之间形成糖苷键。

本发明的方案是微生物转化法制备葛根素的糖基化衍生物，即选择葛根素为被转化的母 核，采用具有葛根素糖基化酶活力的菌体细胞、或该菌体细胞的酶提取液、或该酶的重组表 达蛋白；糖基化的供体选择单糖基或寡糖基；转化位点为葛根素A环上C-7位羟基上，经合适 的微生物转化方法，转化得目标化合物，本发明优选的目标化合物是葛根素-7-O-葡萄糖苷和 葛根素-7-O-异麦芽糖苷。

本发明选用具有葛根素糖基化酶活力的微生物菌种，是任何其它可以糖基化葛根素的微 生物或混合微生物，优选微生物是Microbacterium oxydans CGMCC 1788，也可以是 Microbacterium saperdae CGMCC 1.1906等所有微杆菌属菌种。

本发明对转化合成液的分离纯化的制备方法是：a)转化合成液中的菌体或菌体酶蛋白经加 热沉淀、离心去除；b)用固相萃取、或液相萃取、或柱色谱分离；c)通过重结晶分别纯化。

本方案在转化的众多的转化产物中，优选含葛根素-7-O-葡萄糖苷和葛根素-7-O-异麦芽糖 苷组分方法的转化合成液，用下列方法进行分离，纯化：

1)用固相萃取转化合成液，其固相载体可以是为聚酰氨树脂或大孔树脂，用水和/或醇溶 剂洗脱萃取的树脂，洗脱液浓缩干燥即得；