[发明专利]糖基化葛根素衍生物及其组合物在制备防治心脑血管病应用

权利要求书

1、一种葛根素的糖基化衍生物及其药学上可接受的盐，其特征如结构式(I)所示：

式(I)

式(I)中，母核为葛根素(R＝H)，R选自单糖(6碳糖或5碳糖)基或寡糖(2-5个6碳糖 或/和5碳糖连接)基。

2、根据权力要求1的化合物，其特征是单糖基选择葡萄糖基，甘露糖基，葡萄糖醛酸基，半 乳糖基，半乳糖醛酸基，阿洛糖基，果糖基，山梨糖基，金缕梅糖基，链霉糖基，2-氨基葡 萄糖基，2-氨基半乳糖基，或阿拉伯糖基，来苏糖基，木糖基，核糖基，夫糖基，鼠李糖基， 鸡纳糖基，芹糖基；其寡糖基选择异麦芽糖基、海藻糖基，槐糖基，新陈皮糖基，芸香糖基， 刺槐二糖基，麦芽糖基，蔗糖基，乳糖基，龙胆糖基，果胶基。

3、根据权力要求1的化合物，R优选1个葡萄糖基的化合物称葛根素-7-O-葡萄糖苷，其特征是 葡萄糖基上的半缩醛羟基与葛根素7位碳上的羟基形成糖苷；R优选异麦芽糖基的化合物是葛 根素-7-O-麦芽糖糖苷，其特征是麦芽糖基末端葡萄糖基上的半缩醛羟基与葛根素7-O-葡萄糖 苷的6位羟基之间形成糖苷键。

4、根据权力要求1的化合物，其药学上可接受的盐为金属离子盐或含氮有机碱的盐，其中，

(1)金属离子为碱金属或碱土金属，优选钠、钾、钙、镁；(2)含氮的有机碱，为氨基酸， 优选精氨酸、赖氨酸、肉毒碱；或C1-C40含氮有机碱，优选葡甲胺、氨基葡萄糖，川芎嗪。

5、根据权力要求1的化合物的微生物转化合成方法，糖供体可以是任何一种可以作为糖基化 酶作用的糖供体，糖供体为单糖或寡糖或淀粉，其单糖为6碳糖，如葡萄糖，甘露糖，葡萄糖 醛酸，半乳糖，半乳糖醛酸，阿洛糖，果糖，山梨糖，金缕梅糖，链霉糖，2-氨基葡萄糖， 2-氨基半乳糖，或5碳糖，如阿拉伯糖，来苏糖，木糖，核糖，夫糖，鼠李糖，鸡纳糖，芹糖， 优选葡萄糖；其寡糖为2-5个6碳糖或/和5碳糖脱水缩合而成，海藻糖，槐糖，新陈皮糖，芸香 糖，刺槐二糖，麦芽糖，蔗糖，乳糖，龙胆3糖，果胶，优选麦芽糖。

6、根据权力要求1的化合物的微生物转化合成方法。

1)采用具有葛根素糖基化酶活力的菌体细胞、或该菌体细胞的酶提取液、或该酶的重组表 达蛋白，将糖供体上的单糖基或寡糖基转移到葛根素A环上C-7位羟基上，优选将葡萄糖 基或异麦芽糖基转移到葛根素A环上C-7位羟基上；

2)优选合成葛根素-7-O-葡萄糖苷和/或葛根素-7-O-异麦芽糖苷；

3)转化合成液中的菌体或菌体酶蛋白经加热沉淀、离心去除；

4)用固相萃取、或液相萃取、或柱色谱分离：

a)用固相萃取转化合成液，其固相载体可以是为聚酰氨树脂或大孔树脂，用水和/或醇 溶剂洗脱萃取的树脂，洗脱液浓缩干燥即得；

b)用液相萃取法，其特征是所用溶剂系统是水-有机剂，有机溶剂是正丁醇、或乙酸 乙酯、或氯仿、或乙醚、或己烷，石油醚等，或上述两种或两种以上有机溶剂的混 合物，分取萃取液，浓缩干燥即得。

c)用柱色谱分离转化合成液法，可采用硅胶，或烷基键合硅胶或大孔树脂或聚酰氨树 脂为固定相，进行色谱分离，目标馏分浓缩干燥即得；

5)通过重结晶纯化产物，其特征是：溶剂可以采用水和/或醇溶剂，或醇和/或脂溶性溶剂， 其脂溶性溶剂特征是乙酸乙酯、或氯仿、或乙醚、或环氧乙烷，或己烷、或石油醚。

7、根据权力要求5，6的方法，具有葛根素糖基化酶活力的微生物菌种，是任何其它可以糖 基化葛根素的微生物或混合微生物，优选微生物是Microbacterium oxydans CGMCC 1788，也 可以是Microbacterium saperdae CGMCC 1.1906等所有微杆菌属菌种。

8、按照权利要求4所述盐的制备方法：将结构式(I)化合物与含氮有机碱以1∶0.5～2.0的 摩尔比，在水和/或醇溶剂中反应，或将结构式(I)化合物与含金属离子以1∶0.5～2.0的当 量比，在水和/或醇溶剂中反应。