[发明专利]一种基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法

权利要求书

1、一种基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法，其特征在于：使用专用的微流控芯片分析单细胞内涵物；

所述的微流控芯片为十字型PDMS芯片，由细胞池、空池、缓冲池、废液池构成；

方法过程为：

将十字型PDMS芯片放入等离子体中进行等离子化处理，然后快速取出不可逆封接，加入环氧聚合物涂层液，室温静置10～30分钟，抽干后放入80～120℃烘箱10～30分钟，然后水洗保存备用；

将细胞预标记上染料，与荧光染料孵育10～60分钟，然后用磷酸缓冲液PBS清洗两次，重新悬浮于PBS中，使细胞液的浓度控制在1×10⁶～5×10⁶cells/mL范围内，使单个细胞连续进样；

将细胞悬浮液加入到细胞池中，在缓冲液池和废液池中加入等量的0.1％～0.4％十二烷基磺酸钠SDS的硼酸缓冲液，空池中不加缓冲液；

细胞悬浮液在静压力作用下从细胞池流向空池，在十字交叉口处受到水平方向电场力的作用偏转入分离通道；

细胞在分离通道中在SDS作用下快速裂解，释放出内涵物，内涵物经电泳分离并采用激光焦斑检测，从而实现了对细胞内涵物的分析。

2、按照权利要求1所述的基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法，其特征在于：所述的细胞液的浓度范围为1×10⁶～5×10⁶cells/mL。

3、按照权利要求1所述的基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法，其特征在于：所述的水平方向的电场范围为300～800伏/厘米。

4、按照权利要求1所述的基于微流控芯片的单细胞内涵物分析方法，其特征在于：所述的SDS的硼酸缓冲液的浓度范围为0.1％～0.4％。

5、一种权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于：所述的微流控芯片为十字型PDMS芯片，其垂直通道两端的液池分别为细胞池和空池，水平通道两端的液池分别为缓冲池和废液池，缓冲池和废液池的两端分别接高电压和接地。

6、按照权利要求5所述的微流控芯片，其特征在于：所述的十字型PDMS芯片经过环氧聚合物涂层处理后，抑制了通道表面的电渗流。