[发明专利]一种采用click chemistry反应制备键合型环糊精固定相的方法

说明书

技术领域

本发明涉及色谱固定相，具体的说是一种采用click chemistry反应制备键合型环糊精固定相的方法。

技术背景

环糊精是一类由葡萄糖单元通过1，4-α糖苷键联接起来的环状寡聚糖，具有特殊的穴腔结构，能与许多分子发生“超分子”相互作用，形成“包容络合物”，被称为继冠醚之后的“第二代主体分子”。随着色谱分离技术的快速发展，环糊精在色谱分离(包括毛细管电泳和电色谱)领域得到了广泛应用[Song Li and William C.Purdy，Chem.Rev.1992，92，1457-1470]。将环糊精或者其衍生物通过化学键合的方式固载到硅胶等基质表面作为液相色谱分离材料，显示出很好的分离性能，可用于手性分离[D.W.Armstrong，et al，J Chromatogr.A，1994，743，261-267；Ng Siu Choon，et al，J.Sep Sci.2006，29，1849-1871]，位置异构体分离[Yu-Qi Feng，et al，Anal.Chim.Acta，2004，513，481-492]等。固体基质表面键合环糊精的方法受到了国内外学者的广泛关注，取得了很大进展。前期的研究中，化学键合方法主要是非选择性的键合反应，即同时将环糊精上的所有羟基或多个羟基进行衍生化，然后与硅胶表面的活性基团反应[D.W.Armstrong，US-Patent(1985)4539399]，得到的分离材料表面键合量较高。但是，这些键合方法得到的是交联的环糊精固定相，其表面键合环糊精的结构在一定程度上被破坏，因而其分离选择性也受到了一定影响。近年来，选择性的键合反应越来越受重视，即环糊精或其衍生物上只有一个或几个受限制的基团与硅胶表面的活性基团反应，得到的分离材料表面的环糊精能很好的保持其结构[Siu-Choon Ng，et al，Tetrahedron Lett.2002，43，677-681；Siu-Choon Ng，et al，Tetrahedron Lett.2004，45，4469-4472]，其分离选择性也得到了较大的提高。

近年来，在亲水色谱模式下分离强极性化合物越来越受到关注。亲水作用液相色谱模式类似于正相色谱，使用极性固定相和极性相对较小的流动相，但与正相色谱不同的是其流动相中含水(水含量一般小于40％)[Alpert，A.J.J.Chromatogr.1990，499，177-196；Knut Irgum，et al，J.Sep.Sci.2006，29，1784-1821]。亲水作用色谱的固定相是亲水色谱的核心。目前，对各类亲水作用固定相缺乏系统的比较研究，还没有被广泛使用和普遍接受的亲水作用色谱固定相[Guo，Y.et al，J.Chromatogr.A，2005，1074，71-80]。由于环糊精分子上含有多个羟基，是强亲水的功能分子，适合作为亲水色谱固定相[Knut Irgum，et al，J.Sep.Sci.2006，29，1784-1821]。另外，由于环糊精分子特殊的空间结构，以环糊精分子为功能基团的亲水色谱固定相不仅可以实现简单强极性化合物的分离，而且可以在亲水模式下实现对强极性对映异构体的分离[Mark A.Strege，Anal.Chem.2000，72，1736-1739]。但是，这些选择性的键合环糊精固定相的制备过程较复杂，反应条件也比较苛刻，操作难度大。因此，发展快速、简便的高选择性键合方法具有重要意义。

“点击化学”(click chemistry)是美国斯克利普斯研究所(ScrippsResearch Institute)的K.B.Sharpless教授(2001年诺贝尔化学奖得主)在2001年提出的一个合成化学概念[K.Barry Sharpless，et al，Angew.Chem.Int.Ed.2001，40，2004-2021]，其核心内容是：以高选择性，高转化率，条件温和，操作简单的化学反应来实现功能基团的偶联，达到高效制备功能分子和功能材料的目的。当前，最为广泛使用的“点击化学”(click chemistry)反应是Huisgen 1，3-diploar cycloaddition反应，其反应式如下：