[发明专利]用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基无效

专利信息
申请号: 200710003048.8 申请日: 2007-02-01
公开(公告)号: CN101235362A 公开(公告)日: 2008-08-06
发明(设计)人: 王云峰;童光志;徐灵龙;石星明;王玫 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21
代理公司: 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 代理人: 孙皓晨
地址: 150001黑龙江*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 用于 表达 系统 蛋白 复合 自动 诱导 培养基
【权利要求书】:

1. 一种用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基,以每升培养基计,含有以下重量的各组分:

胰蛋白胨          10-40g

酵母提取物        5-20g

六水琥珀酸钠      0-8.1g

二水柠檬酸钠      0-1.5g

甘油              15-50g

葡萄糖            0.5g

乳糖              2g

磷酸氢二钠        3.55g

磷酸二氢钾        3.40g

氯化铵            2.68g

硫酸钠            0.71g

七水硫酸镁        0.50g

六水氯化铁        0.03g。

2. 按照权利要求1的复合自动诱导培养基,其特征在于:以每升培养基计,含有以下重量的各组分:

胰蛋白胨         20.0g

酵母提取物       10.0g

六水琥珀酸钠     5.40g

二水柠檬酸钠     0.30g

甘油             25.0g

葡萄糖           0.50g

乳糖             2.00g

磷酸氢二钠       3.55g

磷酸二氢钾       3.40g

氯化铵           2.68g

硫酸钠           0.71g

七水硫酸镁    0.50g

六水氯化铁    0.03g。

3. 权利要求1或2的复合自动诱导培养基在表达外源蛋白中的应用,包括:将含有目的基因的大肠杆菌接种于本发明复合自动诱导培养基中,37℃,振荡培养12-24小时,收集所表达的外源蛋白。

4. 按照权利要求3的应用,其特征在于:挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落接种于装有10ml细菌高密度增值培养基的250ml三角瓶中,37℃,250rpm培养12h;按1∶1000的接种比例加入到装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中,继续培养12h,收集所表达的外源蛋白。

5. 按照权利要求3的应用,其特征在于:直接挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落,放入装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中在37℃,250rpm过夜培养,收集所表达的外源蛋白。

6. 按照权利要求3的应用,其特征在于:直接挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落,放入装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中在37℃,250rpm培养3-4h,略见混浊后放入低温摇床振荡培养,收集所表达的外源蛋白。

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