[发明专利]用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基无效
申请号: | 200710003048.8 | 申请日: | 2007-02-01 |
公开(公告)号: | CN101235362A | 公开(公告)日: | 2008-08-06 |
发明(设计)人: | 王云峰;童光志;徐灵龙;石星明;王玫 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 孙皓晨 |
地址: | 150001黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 表达 系统 蛋白 复合 自动 诱导 培养基 | ||
1. 一种用于原核表达系统表达外源蛋白的复合自动诱导培养基,以每升培养基计,含有以下重量的各组分:
胰蛋白胨 10-40g
酵母提取物 5-20g
六水琥珀酸钠 0-8.1g
二水柠檬酸钠 0-1.5g
甘油 15-50g
葡萄糖 0.5g
乳糖 2g
磷酸氢二钠 3.55g
磷酸二氢钾 3.40g
氯化铵 2.68g
硫酸钠 0.71g
七水硫酸镁 0.50g
六水氯化铁 0.03g。
2. 按照权利要求1的复合自动诱导培养基,其特征在于:以每升培养基计,含有以下重量的各组分:
胰蛋白胨 20.0g
酵母提取物 10.0g
六水琥珀酸钠 5.40g
二水柠檬酸钠 0.30g
甘油 25.0g
葡萄糖 0.50g
乳糖 2.00g
磷酸氢二钠 3.55g
磷酸二氢钾 3.40g
氯化铵 2.68g
硫酸钠 0.71g
七水硫酸镁 0.50g
六水氯化铁 0.03g。
3. 权利要求1或2的复合自动诱导培养基在表达外源蛋白中的应用,包括:将含有目的基因的大肠杆菌接种于本发明复合自动诱导培养基中,37℃,振荡培养12-24小时,收集所表达的外源蛋白。
4. 按照权利要求3的应用,其特征在于:挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落接种于装有10ml细菌高密度增值培养基的250ml三角瓶中,37℃,250rpm培养12h;按1∶1000的接种比例加入到装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中,继续培养12h,收集所表达的外源蛋白。
5. 按照权利要求3的应用,其特征在于:直接挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落,放入装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中在37℃,250rpm过夜培养,收集所表达的外源蛋白。
6. 按照权利要求3的应用,其特征在于:直接挑取含有目的基因的大肠杆菌单菌落,放入装有权利要求1所述复合自动诱导培养基的三角瓶中在37℃,250rpm培养3-4h,略见混浊后放入低温摇床振荡培养,收集所表达的外源蛋白。
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