[发明专利]测量吸附变应原酶的酶活性的方法

权利要求书

1.测量以一种或多种变应原酶和氢氧化铝的混合物形式的疫苗制 剂的免疫活性的方法，其中所述混合物包含液相和固相，且其中至少一 部分所述变应原酶吸附到固相上，所述方法包括下述步骤：在酶活性测 定法中测量所述混合物的酶活性和/或测量在液相与固相分离后液相中 的变应原酶的酶活性和/或测量在液相与固相分离后固相中的变应原酶 的酶活性，和使用获得的测量结果作为所述疫苗制剂的免疫活性的指 示。

2.用于定量以一种或多种变应原酶和氢氧化铝的混合物形式的疫 苗制剂中的变应原酶的量的方法，其中所述混合物包含液相和固相，且 其中至少一部分所述变应原酶吸附到固相上，所述方法包括下述步骤： 在酶活性测定法中测量所述混合物的酶活性和/或测量在液相与固相分 离后液相中的变应原酶的酶活性和/或测量在液相与固相分离后固相中 的变应原酶的酶活性，和使用获得的测量结果用于定量变应原酶的量。

3.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中对变应原酶特异的底 物用于测量变应原酶的酶活性。

4.根据权利要求3的方法，其中抑制剂用于抑制所述疫苗制剂中 的变应原酶中的一种或多种。

5.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述一种或多种变应 原酶选自树花粉变应原、草花粉变应原、草药花粉变应原、螨变应原、 毒液变应原、动物毛发和皮屑变应原以及食物变应原。

6.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述一种或多种变应 原酶是提取物的形式。

7.根据权利要求6的方法，其中测量所述提取物的主要变应原的 酶活性。

8.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述变应原酶是房尘 螨变应原。

9.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述变应原酶中的至 少一种是半胱氨酸蛋白酶。

10.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述变应原酶中的 至少一种是丝氨酸蛋白酶。

11.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述一种或多种变 应原酶是选自Der p1、Der p3、Der p6和Der p9中的一种或多种。

12.根据权利要求11的方法，其中所述变应原酶是Der p1。

13.根据权利要求3的方法，其中使用的所述底物是 Z-LeuLeuGlu-MCA。

14.根据权利要求4的方法，其中使用的所述抑制剂选自E64(L- 反式-环氧琥珀酰-L-亮氨酰氨基(4-胍基)丁烷)和其他环氧化物。

15.根据权利要求14的方法，其中使用的所述抑制剂是E64。

16.根据权利要求11的方法，其中所述一种或多种变应原酶是选 自Der p3、Der p6和Der p9中的一种或多种。

17.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述疫苗制剂包含 无酶活性的一种或多种另外的变应原。

18.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中所述酶活性测定法 是吸光度测定法、荧光测定法、FTIR或免疫法。

19.根据权利要求18的方法，其中所述酶活性测定法是ELISA。

20.根据权利要求18的方法，其中所述酶活性测定法是荧光测定 法。

21.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中仅对所述疫苗制剂 实施液相和固相的混合物中的变应原酶的酶活性的测量。

22.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中仅对所述疫苗制剂 实施在液相与固相分离后液相中的变应原酶的酶活性的测量。

23.根据权利要求1-2中任一项的方法，其中仅对所述疫苗制剂 实施在液相与固相分离后固相中的变应原酶的酶活性的测量。