[发明专利]不含凝血酶的生物粘合剂及其作为药剂的应用

说明书

本发明涉及一种基于纤维蛋白原的生物粘合剂，含有激活的因子VII及 钙离子源。

“生物粘合剂”是指一种可以连接组织成分(皮肤、骨、各种器官)的 组分，同时使受损伤的组织止血，因此可以加强或完善因缝合形成的对这 些组织的连接。

血液凝结通过凝血瀑布的各个步骤而实现，包括将血液中的各种酶原 和辅助因子原在蛋白酶的作用下转化为激活状态。这一连续的凝血步骤， 或称凝血瀑布，通过导致凝血酶原转化为凝血酶的两种凝血系统来实现， 即外源性凝血途径和内源性凝血途径。

外源性凝血途径包括存在于血液中的因子VII的介入。然而，后者需激 活(因子VIIa)以启动这种凝血瀑布。因子VIIa具有较低的酶活性，直到其与 组织损伤后释放的磷脂特性的组织因子复合后活性才较高。如上复合的VIIa 在钙离子参与的情况下，将因子X(FX)转化为因子Xa(FXa)。因子Xa接 着将凝血酶原转化为凝血酶，凝血酶可激活因子V(因子Va)。凝血酶还可 以激活因子VII(因子VIIIa)。在存在钙离子、组织因子和因子Va的情况下， 凝血酶作用于纤维蛋白原，将其转化为纤维蛋白。在因子VIIIa的参与下， 得以形成具有固态、可粘着的筛孔状网络的纤维蛋白凝块，所述纤维蛋白 网络被当作支架，在固化的瘢痕组织的形成过程中被逐渐、缓慢地吸收。 至少在瘢痕组织形成的过程中，这种交联的纤维蛋白不可溶解，也不会为 纤溶酶所攻击。

内源性凝血途径也涉及因子VIIa(FVIIa)。该途径包括一个反应瀑布，通 过因子XII(FXII)导致了凝血酶的激活。因子XII激活因子XI(因子XIa-FXIa)， 因子XIa在存在磷脂组织因子(FT)的情况下激活因子IX(因子IXa-FIXa)。 因子IXa在存在因子VIIIa、组织因子和钙离子的情况下，参与因子X向因子 Xa的激活。这一过程然后导致凝血酶原向凝血酶的转化。应当注意，因 子Xa或凝血酶的存在使得因子VII可以被激活(因子VIIa)。

由此可见，在内源性凝血机制中，因子XIIa具有突出的作用，导致了 血凝块的形成。其被应用于治疗血友病A，该病具有一种循环抑制物，即 一种限制或阻止因子VIII(FVIII)激活的特异性抗体。因子VIIa具有这样的优点： 在存在组织损伤导致出血后释放的组织因子的情况下，即使缺乏因子VIII和 IX，它也可以在局部发挥作用。

然而，根据前述的机理，在出血性的组织损伤是由外伤、创伤、外科 手术导致的情况下，特别是为了通过形成纤维蛋白血凝块以阻止出血，需 要利用缝合进行组织修复。可以证明，特别是在大型外科手术中有必要增 强对损伤组织的止血。

例如，可提到专利申请WO 93/06855，其中描述了一种不含有凝血酶和 凝血因子的止血组合物，其包括有引入至可生物相容的载体中的因子VIIa， 所述组合物作为一个整体应用于出血性损伤，以便加强止血和纤维蛋白血 凝块的形成。

然而，除了受损伤组织的止血外，无论是否缝合，都应该加速、加强 甚至完善涉及组织连接处的组织愈合的自然过程，以避免损伤恶化及加速 愈合过程。通过局部应用生物粘合剂，很有可能实现上述目的。

生物粘合剂由多种使血液凝结的循环因子(特别是纤维蛋白原血浆蛋 白和因子XIII)的混合物组成。其进一步需要提供外源性凝血酶——一种将 纤维蛋白原转化为可溶解的纤维蛋白所必需的酶，所述可溶解的纤维蛋白 通过因子XIII产生交联。还需要其它的组分来实现纤维蛋白原的凝结，特 别是钙离子，例如氯化钙，可能还需要抑肽酶，因为其具有抗纤溶特性。

这类生物粘合剂在多个出版物和专利文献中都有详细描述，例如 EP 0305243，FR 2448900和FR2448901，还描述了它们在多种临床情况中 的应用(“Fibrinkleber”，Proceedings of the Heidelberg Congress，1976， Ed.Schattauer)。

在等待通过生物体细胞的自然再生而逐渐固化的过程中，为了加强其 机械性能，生物粘合剂也可以用于将不同特性的生物材料(胶原、藻酸盐、 聚乳酸)与生物组织进行粘结，例如人造皮肤。