[发明专利]DNA模块克隆载体质粒和其应用方法

权利要求书

1.一种由DNA克隆载体组成的结构域模块停靠载体，其包含用于将感 兴趣遗传物质亚克隆到多克隆(MC)模块中的MC模块，所述MC模块包含：

a.第一基因枢(GP)，其含有可通过操作限定MC模块5′部分的至少两 个恒定的罕见限制性位点；

b.含有包括多个限制性位点的多克隆位点(MCS)的核酸序列，以便为 将感兴趣遗传物质克隆到MC模块中提供克隆位点，所述限制性位点选自 结构域模块停靠载体中独特的常见限制性位点；和

c.第二基因枢，其含有可通过操作限定MC模块3′部分的至少两个恒 定的罕见限制性位点。

2.如权利要求1所述的结构域模块停靠载体，其特征在于，所述第一基 因枢和第二基因枢独立地包含至少3个、不多于4个恒定的罕见限制性位点。

3.如权利要求1所述的结构域模块停靠载体，其特征在于，所述感兴趣 的遗传物质选自启动子结构域、表达结构域或3′调控结构域。

4.如权利要求1所述的结构域模块停靠载体，其特征在于，所述恒定的 罕见限制性位点选自AsiS I、Pac I、Sbf I、Fse I、Asc I、Mlu I、SnaB I、Not I、 Sal I、Swa I、Rsr II、BSiW I、Sfo I、Sgr AI、Afl III、Pvu I、Ngo MIV、Ase I、 Flp I、Pme I、Sda I、Sgf I、Srf I或Sse8781 I。

5.如权利要求4所述的结构域模块停靠载体，其特征在于，当所述感兴 趣遗传物质是启动子结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性位点至少选自 AsiS I、Pac I或Sbf I，所述第二组恒定的罕见限制性位点至少选自Fse I、Asc I或Mlu I；

当所述感兴趣遗传物质是表达结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性位 点至少选自Fse I、Asc I或Mlu I，所述第二组恒定的罕见限制性位点至少选自 SnaB I、Not I或Sal I；和

当所述感兴趣遗传物质是3’调控结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性 位点至少选自SnaB I、Not I或Sal I，所述第二组恒定的罕见限制性位点至少 选自Swa I、Rsr II或BSiW I。

6.如权利要求5所述的结构域模块停靠载体，其特征在于，当所述感兴 趣遗传物质是启动子结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性位点依次由AsiS I、Pac I和Sbf I组成，所述第二组恒定的罕见限制性位点依次由Fse I、Asc I 和Mlu I组成；

当所述感兴趣遗传物质是表达结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性位 点依次由Fse I、Asc I和Mlu I组成，所述第二组恒定的罕见限制性位点依次 由SnaB I、Not I和Sal I组成；和

当所述感兴趣遗传物质是3’调控结构域时，所述第一组恒定的罕见限制性 位点依次由SnaB I、Not I和Sal I组成，所述第二组恒定的罕见限制性位点依 次由Swa I、Rsr II和BSiW I组成。