[发明专利]乳酸的制造方法

权利要求书

1.一种乳酸的制造方法，其包括在培养基中培养微生物，从而在培养 物中生成乳酸并使其蓄积，然后从该培养物中采集乳酸，其中，所述微生 物中的4-羟基苯甲酸聚异戊二烯基转移酶活性或2-八异戊二烯基苯酚羟化 酶活性降低或丧失，所述微生物具有生产乳酸的能力，且所述微生物为原 核生物。

2.权利要求1所述的乳酸的制造方法，其中，微生物具有对下述蛋白 质进行编码的基因的一部分或全部缺失了的染色体DNA，所述蛋白质具有 4-羟基苯甲酸聚异戊二烯基转移酶活性或2-八异戊二烯基苯酚羟化酶活性。

3.权利要求2所述的乳酸的制造方法，其中，基因为对下述蛋白质进 行编码的基因：具有序列号1或序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质，或 者与序列号1或2所示的氨基酸序列具有80％以上的同源性、且具有4-羟 基苯甲酸聚异戊二烯基转移酶活性或2-八异戊二烯基苯酚羟化酶活性的蛋 白质。

4.权利要求2所述的乳酸的制造方法，其中，基因为具有序列号3或 序列号4所示的碱基序列的基因，或者为在严格条件下和具有与序列号3 或4所示的碱基序列互补的碱基序列的多核苷酸杂交且对下述蛋白质进行 编码的基因，所述蛋白质具有4-羟基苯甲酸聚异戊二烯基转移酶活性或2- 八异戊二烯基苯酚羟化酶活性。

5.权利要求1～4任一项所述的乳酸的制造方法，其中，微生物为通过 选自下述[1]～[4]的方法而强化了生产乳酸的能力的微生物，

[1]将控制乳酸的生物合成的机制的至少一个缓和或解除的方法；

[2]将与乳酸的生物合成相关的酶的至少一个的表达强化的方法；

[3]使与乳酸的生物合成相关的酶基因的至少一个的拷贝数增加的方 法；

[4]将从乳酸的生物合成路径分支的代谢路径的至少一个弱化或阻断 的方法。

6.权利要求1～4任一项所述的乳酸的制造方法，其中，微生物是属于 下述属的微生物：欧文氏菌属、沙雷菌属、沙门菌属、埃希氏菌属、变形 杆菌属、假单胞菌属、酸硫杆状菌属、不动杆菌属、土壤杆菌属、芽孢杆 菌属、博德特菌属、短根瘤菌属、布鲁氏杆菌属、伯霍尔德杆菌属、柄杆 菌属、绿屈挠菌属、梭菌属、考克斯体属、脱亚硫酸菌、地杆菌属、嗜血 杆菌属、军团菌属、钩端螺旋体属、Magnetococcus、磁螺菌属、曼氏杆菌 属、中生根瘤菌属、甲基芽孢杆菌属、甲基杆菌属、分枝杆菌属、奈瑟球 菌属、亚硝化单孢菌属、念珠藻属、巴斯德菌属、原绿球藻属、红杆菌属、 红球菌属、红假单胞菌属、立克次体属、志贺菌属、中华根瘤菌属、鞘胺 醇单胞菌属、链霉菌属、聚球藻属、集胞藻属、弧菌属、木质部小菌属、 耶尔森氏菌属、发酵单胞菌属或黄单胞菌属。

7.权利要求1～4任一项所述的乳酸的制造方法，其中，微生物是选自 下述组中的微生物：草生欧文氏菌、解淀粉欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏 菌、粘质沙雷菌、鸟氨酸脱羧酶阴性沙雷菌、居泉沙雷菌、鸟氨酸脱羧酶 阳性沙雷菌、肠炎沙门菌亚属、肠炎沙门菌、副伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、 都伯林沙门菌、鼠伤寒沙门菌、大肠埃希杆菌、雷氏变形菌、恶臭假单胞 菌、萤光假单胞菌、铜绿假单胞菌、德阿昆假单胞菌、萤光假单胞菌、丁 香假单胞菌、Pseudomonas thazdinophilum、嗜酸氧化亚铁硫杆菌、不动杆 菌ATCC 33305、根癌土壤杆菌、嗜碱芽孢杆菌、支气管炎博德特菌、副百 日咳博代氏菌、百日咳博德特菌、慢生型大豆根瘤菌、马尔他布鲁杆菌、 类鼻疽伯霍尔德杆菌、新月柄杆菌、橙色绿屈挠菌、丙酮丁醇梭菌、肉毒 梭菌、艰难梭菌、伯内特考克斯体、Desulftobacterium hafniense、芳香族化 合物降解耦连铁还原细菌、杜克雷嗜血杆菌、嗜肺军团病杆菌、问号钩端 螺旋体、Magnetococcus MC-1、趋磁螺旋菌、溶血曼海姆菌、百脉根中生 根瘤菌、Methylobacillus flagellatus、甲基营养菌属、牛分枝杆菌、麻风分 枝杆菌、海分枝杆菌、结核分支杆菌、淋病奈瑟球菌、脑膜炎奈瑟球菌、 欧洲亚硝化毛杆菌、点形念珠藻、多杀巴斯德菌、原核绿藻、荚膜红杆菌、 苯酚降解菌红球菌菌株124、沼泽红假单胞菌、普氏立克次体、弗氏志贺菌、 苜蓿中华根瘤菌、溶芳烃鞘氨醇单胞菌、阿维链霉菌、天蓝色链霉菌、聚 球藻WH8102、集胞藻PCC6803、霍乱弧菌、苛养木杆菌、鼠疫耶尔森氏 菌、运动发酵单孢菌、水稻黄单胞菌和甘蓝黑腐病黄单胞杆菌。