[发明专利]用于生产具有增强的效应子功能的抗体恒定区的宿主细胞系

权利要求书

1.得自大鼠骨髓瘤细胞系YB2/0(ATCC 1662)的、用于生产抗体 的分离的细胞系，所述细胞系生产糖基化多肽，所述糖基化多肽的特 征在于，与使用YB2/0(ATCC 1662)生产的多肽相比，具有显著降低 的岩藻糖含量。

2.权利要求1的细胞系，其中所述细胞系通过使大鼠杂交瘤细胞 系YB2/0(C1083A)适应于在无动物蛋白的培养基CD-Hybridoma (CD-Hyb)中生长而由细胞系YB2/0(C1083A)开发，并命名为C1083B。

3.权利要求1的细胞系，其中所述细胞系为基于高转染效率、短 平均倍增时间和在CD-Hyb中达到高细胞密度的能力中的至少一项而 选择的C1083B的亚克隆，其中所述细胞系被命名为C1083E。

4.权利要求1的细胞系，其中fut8 mRNA水平低于野生型YB2/0 细胞系的水平。

5.权利要求1的细胞系，其中根据对凝集素的抗性选择所述细胞 系。

6.权利要求2的细胞系，其中所述细胞系的糖基化肽与野生型骨 髓瘤细胞系和CHO细胞系生产的肽相比，具有显著减少的岩藻糖含 量。

7.由权利要求1-6中任一项的转染宿主细胞系生产的抗体，其中 所述分子的特征在于主要具有非岩藻糖基化N-联寡糖基团。

8.权利要求7的抗体，其中所述抗体与在野生型YB2/0细胞系 中生产的抗组织因子抗体相比，具有增加的ADCC活性。

9.生物药物组合物，其包含与药学上可接受的载体组合的权利要 求7的抗体。

10.生产抗体的方法，所述方法包括：

将编码所述抗体的多核苷酸序列转染入权利要求1的细胞系中； 和

以可检测的或可回收的量表达所述抗体。

11.权利要求10的生产抗体的方法，其中由所述多核苷酸序列编 码的抗体为人抗体。

12.权利要求10的生产抗体的方法，其中由所述多核苷酸序列编 码的抗体为人源化抗体。

13.权利要求11或12的生产抗体的方法，其中由所述多核苷酸 序列编码的抗体结合可连接至细胞表面的人多肽区域。

14.通过权利要求10的方法生产的抗体，其中由所述多核苷酸序 列编码的回收抗体的特征在于主要具有非岩藻糖基化的N-联寡糖基 团。

15.通过权利要求10的方法生产的抗体，其包含SEQ ID NO：9 的轻链氨基酸序列和SEQ ID NO：8的重链氨基酸序列。

16.通过权利要求10的方法生产的抗体，其包含SEQ ID NO：11 的轻链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO：10的重链可变区氨基酸序列。

17.治疗疾病或病症的方法，所述方法包括给受试者、细胞或组 织施用权利要求14-16中任一项的抗体，或使受试者、细胞或组织接 触权利要求14-16中任一项的抗体。

18.权利要求17的方法，其中所述疾病或病症为肿瘤疾病或免疫 介导的疾病，在所述疾病中，期望破坏展示出所述抗体能够结合的多 肽的细胞。

19.权利要求18的方法，其中所述抗体能够结合的多肽为人组织 因子或人TNFα。

20.权利要求18的方法，其中所述疾病或病症的特征在于异常的 血管发生，所述异常的血管发生选自类风湿性关节炎、黄斑变性、银 屑病和糖尿病性视网膜病。

21.权利要求19的方法，其中所述疾病或病症的特征在于由所述 细胞释放所述多肽。

22.本文公开的任何发明。