[发明专利]通过同步化植物细胞培养的次级代谢产物批量生产的稳定化方法

权利要求书

1.一种从植物形成层分离单细胞克隆的方法，所述方法包括：

(a)制备植物组织然后对其进行灭菌；

(b)从所述灭菌的植物组织中收集含有形成层的组织；

(c)培养所述含有形成层的组织，由此诱导由形成层增殖的形成 层和来自韧皮部、皮层、表皮组织并以不规则形式增殖的愈伤组织层； 和

(d)通过从所述愈伤组织层分离所述形成层来收集来自植物形 成层的单细胞克隆。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)包括在 含有植物激素的培养基中培养所述组织。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，培养基含有1～3mg／L 的植物激素。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，植物为紫杉属。

5.根据权利要求1-4中任一项的方法制备的、衍生自植物形成 层的单细胞克隆。

6.一种生产来源于植物的生物活性物质的方法，所述方法包括 如下步骤：

(a)通过培养根据权利要求5所述的单细胞克隆来生产活性物质； 和

(b)收集所述活性物质，其中所述单细胞克隆为来源于紫杉属 形成层的单细胞克隆，并且所述活性物质为紫杉醇。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(a)的培养 包括回收培养所述单细胞克隆中所用的培养基然后供应新培养基。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在进一步含有选 自茉莉酮酸甲酯、苯丙氨酸或壳聚糖的培养基中培养来源于紫杉属形 成层的单细胞克隆。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在进一步含有茉 莉酮酸甲酯、苯丙氨酸和壳聚糖的培养基中培养来源于紫杉属形成层 的单细胞克隆。

10.一种用于保存植物单细胞克隆的方法，所述方法包括低温储 存根据权利要求1至4中任一项所述的方法分离的单细胞克隆。